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wanghong-0714

木虫 (正式写手)

[交流] 这是我提取的RNA电泳图谱

最左边和最右边的为maeker,从左向右泳道1,2,4,5,6,7为水稻RNA,泳道3为飞虱(一种昆虫)的RNA,这样的RNA做RT-PCR没有扩增出目的条带,大家帮忙分析一下是怎么回事?

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-6 at 17:39 ]
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
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司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 9-6 17:26
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 9-6 17:26
你的RNA降解挺厉害,Marker跑的也不好,不知你电泳后把样品放多少度了,放-80做好,要不容易降解,你把电泳液换成新的再跑一遍RNA看是否已降解!
砖石王老三!!!
2楼2009-09-06 15:45:45
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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司马诸葛(金币+2,VIP+0):鼓励交流 9-6 17:26
amisking(金币+8,VIP+0):欢迎发帖交流!鼓励新虫! 9-6 17:27
今天我和师姐刚好也做了RNA提取,亮度比你的要亮一点,不过听师姐说上次她提的也很亮,PCR也没成功。RNA太容易降解,提出来clean后最好马上转成cDNA保存。我也是新手,希望老师们多多指教。
3楼2009-09-06 16:30:04
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是保存有问题,降解的厉害!
jiayoubashaonian
4楼2009-09-06 17:06:42
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zuodongyun

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
主带比较模糊,降解了,扩不出目的带很正常,最好再提一次RNA,如果可能的话,建议用invitrogen的TRIzol,我用的时候,效果很好,条带很清晰,完整的RNA是试验成功的关键
5楼2009-09-06 18:25:57
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wanghong-0714

木虫 (正式写手)

我用的就是invitrogen的TRIzol,这是第一次提RNA,可能是操作不规范吧,我在检测一下吧,谢谢大家
6楼2009-09-06 18:33:29
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kitty8682

金虫 (正式写手)

学习了
7楼2009-09-07 09:01:52
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小白3521

金虫 (小有名气)


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但是我有的时候提RNA都跑不出很漂亮的带,一样能P出目的条带
8楼2009-09-07 09:42:36
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9楼2009-09-07 10:07:57
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woodyqlee

铁虫 (初入文坛)


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这个RNA质量其实还可以,我想可能更多的是逆转录或者PCR过程中的问题,不知道你有没有扩增内参基因,比如GAPDH什么的,如果这个扩增出来了,那表明你的逆转录没有问题,是PCR的问题,如果内参没有扩增成功,那很可能就是逆转录的问题了。
10楼2009-09-07 10:11:47
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