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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 这是我提取的RNA电泳图谱
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wanghong-0714

木虫 (正式写手)

[交流] 这是我提取的RNA电泳图谱

最左边和最右边的为maeker，从左向右泳道1，2，4，5，6，7为水稻RNA，泳道3为飞虱（一种昆虫）的RNA，这样的RNA做RT-PCR没有扩增出目的条带，大家帮忙分析一下是怎么回事？

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-6 at 17:39 ]
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1楼 2009-09-06 15:17:32
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jack6335

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 9-6 17:26
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 9-6 17:26
你的RNA降解挺厉害，Marker跑的也不好，不知你电泳后把样品放多少度了，放-80做好，要不容易降解，你把电泳液换成新的再跑一遍RNA看是否已降解！
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砖石王老三！！！
2楼2009-09-06 15:45:45
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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amisking(金币+8,VIP+0):欢迎发帖交流！鼓励新虫！ 9-6 17:27
今天我和师姐刚好也做了RNA提取，亮度比你的要亮一点，不过听师姐说上次她提的也很亮，PCR也没成功。RNA太容易降解，提出来clean后最好马上转成cDNA保存。我也是新手，希望老师们多多指教。
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3楼2009-09-06 16:30:04
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
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可能是保存有问题，降解的厉害！
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jiayoubashaonian
4楼2009-09-06 17:06:42
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zuodongyun

铁杆木虫 (正式写手)
★
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主带比较模糊，降解了，扩不出目的带很正常，最好再提一次RNA，如果可能的话，建议用invitrogen的TRIzol，我用的时候，效果很好，条带很清晰，完整的RNA是试验成功的关键
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5楼2009-09-06 18:25:57
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wanghong-0714

木虫 (正式写手)
我用的就是invitrogen的TRIzol，这是第一次提RNA，可能是操作不规范吧，我在检测一下吧，谢谢大家
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6楼2009-09-06 18:33:29
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kitty8682

金虫 (正式写手)
学习了
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7楼2009-09-07 09:01:52
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小白3521

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
但是我有的时候提RNA都跑不出很漂亮的带，一样能P出目的条带
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8楼2009-09-07 09:42:36
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sinkiang
9楼2009-09-07 10:07:57
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woodyqlee

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个RNA质量其实还可以，我想可能更多的是逆转录或者PCR过程中的问题，不知道你有没有扩增内参基因，比如GAPDH什么的，如果这个扩增出来了，那表明你的逆转录没有问题，是PCR的问题，如果内参没有扩增成功，那很可能就是逆转录的问题了。
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10楼2009-09-07 10:11:47
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