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稻草人2011铁杆木虫 (正式写手)
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[求助]
大肠杆菌表达载体拷贝数问题
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大家好,最近在做大肠杆菌的表达优化,因为目标蛋白的折叠速率低,所以想优化载体的拷贝数。 目前所用表达载体的origin有两个,一个是f1 origin,一个是ColE1 pBR322 origin。在文献上看ORI为ColE1 的拷贝数大概为40,请问1. 如果要换成更低拷贝数的ORI, 比如pSC101,需要更换表达载体和宿主吗?目前的宿主是BL21 (DE3). 2. 如果不需要换表达载体和宿主,可以直接用新的ORI碱基序列替换掉原先的ORI序列吗?3. 载体上的ORI具体是哪一段可以用什么软件分析出来呢? 万分感谢! |
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Rose56882
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