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以已有的PCR产物做模板进行PCR
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我原来做克隆的时候扩增得到过一批PCR产物。现在因为要更换PCR产物两端的酶切位点,就采取如下策略:以原来的PCR产物作为模板,用具备新酶切位点的引物扩增,以获得具备新酶切位点的PCR产物。 我把之前扩增得到的PCR产物(-20度冻存)稀释100倍,作为模板进行扩增。然而,电泳结果显示有的PCR产物目的条带不足够明显,而且有很长的smere拖带。 各位对此有何见解呢? |
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