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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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gss8285

铜虫 (小有名气)

[交流] 请教流式细胞术测全血中干细胞个数! 已有1人参与

由于本人是学化学的,想测定一下给药前后外周血中内皮祖细胞含量的变化。
设计了个实验方案,有错误和不足之处还请各位高手指教:
1)抽兔血,肝素抗凝
2)加入红细胞裂解液溶解红细胞,溶血15-20min,PBS洗两次
3) 加入一抗,孵育30min,PBS洗一次,1500rpm,离心3min,弃上清
4)加入荧光标记二抗,室温避光20-30min,PBS洗一次,1500rpm,离心3min,弃上清
5)加入适量PBS,上机检测(若不能及时上级检测,可加1ml 1%多聚甲醛固定,可放置一周)

几个问题:
1)为什么要加裂解液溶解红细胞
2)PBS洗弃上清液的时候,应弃掉多少,怎么掌控
3)流式细胞仪检测细胞个数时,细胞最少多少能检测到
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gss8285

铜虫 (小有名气)

??????
2楼2009-09-03 14:13:51
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dljbest

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
溶解红细胞是为了检测白细胞中祖细胞的含量
3楼2010-05-26 22:09:17
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