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yghboy168

银虫 (小有名气)

[交流] HindIII酶切过夜后什么也没有了

质粒被HindIII酶切后就没有条带了
见附件。这是什么原因?质粒跑过胶浓度很大。我的是10微体系:6.5质粒提取物,2微BSA,1微 10×BUFFER,0.5微酶。10微全部加入胶孔。我用的是上海博彩的酶,就是俄罗斯sibenzyme西伯公司的。大家有没有用过?难到酶有问题?
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眼内有尘三界窄,心头无事一床宽!
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heismeng

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你做个colony PCR不就知道了吗
而且你的图我也看不懂 上面不是有一个BAND吗
先做colony PCR
然后直接测序就可以了
实在想做digestion 做double digestion vector和insert上个找一个酶切位点
9楼2009-09-01 13:02:45
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hungover

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主最好说清楚一些,从什么菌株提取的质粒,有些表达菌株提取出的质粒不是很稳定!溶解在buffer中易降解。
2楼2009-08-31 09:54:11
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xinlai

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
做个空白对照看看质粒过夜的效果吧
3楼2009-08-31 10:35:22
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jessica533

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没用过这个公司的,可以同时用HindIII切一下另一种质粒,验证一下酶是否好用
把忧愁微掉,将快乐积起。
4楼2009-08-31 14:44:46
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