24小时热门版块排行榜    

查看: 609  |  回复: 5
当前主题已经存档。

x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] 毕赤酵母做宿主表达的基本过程

大家好,我最近想将植物中的一段基因在毕赤酵母中表达,以前用过大肠杆菌做宿主,对毕赤酵母的操作不了解;请做过的虫友介绍一下基本过程,多谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sun22741592

金虫 (小有名气)


x8q4h11(金币+1,VIP+0): 9-2 12:20
我用pichia系统表达过乙肝病毒的一个基因,用的试剂什么的都是invitrogene的,结果SDSPAGE,western都没有特异条带。表达效果不咋地
2楼2009-09-01 14:51:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kitty8682

金虫 (正式写手)


x8q4h11(金币+1,VIP+0): 9-2 12:21
我用毕赤酵母表达系统,将目的基因连上表达载体,电转到酵母细胞,表达效果还不错
3楼2009-09-02 08:01:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

x8q4h11

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by kitty8682 at 2009-9-2 08:01:
我用毕赤酵母表达系统,将目的基因连上表达载体,电转到酵母细胞,表达效果还不错

连到表达载体后,单切线性化也是采用胶回收试剂盒回收此片段再转化吗?我看到操作手册上写着乙醇沉淀之类的,不太明白怎么操作,望指教。谢谢
4楼2009-09-03 09:03:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jack6335

铁杆木虫 (正式写手)

线性化后你可以用乙醇沉淀法纯化目的片段,也可以用试剂盒,有时线性化后还要对目的基因磷酸化,以提高转化效率。
砖石王老三!!!
5楼2009-09-05 21:49:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jack6335

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
x8q4h11(金币+2,VIP+0):谢谢 9-6 12:56
线性化后你可以用乙醇沉淀法纯化目的片段,也可以用试剂盒,有时线性化后还要对目的基因磷酸化,以提高转化效率。
砖石王老三!!!
6楼2009-09-05 21:50:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 x8q4h11 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:40 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见