应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » WB时，上方时常出现非特异性条带
51/1返回列表
查看: 1196  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

是科研小迷糊呀

金虫 (小有名气)
已领完
WB时，上方时常出现非特异性条带
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫，下载小木虫客户端

问题描述：WB相关问题！！！
最近一直在做WB，但是出现一个不正常的情况，前面验证抗体的时候，抗体是比较好的，但是后面正式开始实验的时候，在目的条带的上方总是出现一个非特异性条带，并且颜色很深，后面重复几次之后，发现同一批蛋白样品有时出现这样的情况，有时会恢复正常，且同一批做的其他的抗体也会同时出现这种现象（正常的时候都正常，不出现上线的带，不正常的时候都不正常，所有抗体上面都出现一条带。
请大家帮帮忙，困扰了很久的问题，谢谢！

WB时，上方时常出现非特异性条带


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2022-01-25 17:30:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuaibia6

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我对wb不是很了解，但是从PAGE胶图来看造成这种现象的原因应该是这2次电泳的迁移速率不一样，导致胶图呈现不一样的效果。
赞一下 回复此楼
8楼2022-01-26 11:11:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

刘楠楠05

新虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你正常情况下，也是三条带，只是最上面那个带弱，说明抗体是能敷出这个带，是多克隆抗体吧？你说的非正常条带是最上面那个杂带很亮，是蛋白裂解问题，还是蛋白降解问题？下次注意细胞裂解和降解问题，同时可以试试把这个杂带跑分开，剪掉。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2022-01-25 19:38:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

是科研小迷糊呀

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 刘楠楠05 at 2022-01-25 19:38:21
你正常情况下，也是三条带，只是最上面那个带弱，说明抗体是能敷出这个带，是多克隆抗体吧？你说的非正常条带是最上面那个杂带很亮，是蛋白裂解问题，还是蛋白降解问题？下次注意细胞裂解和降解问题，同时可以试试把 ...

这两个图是同一批样品做的，同一批样品，条件都一样的情况下，就会有这两种情况。并且同一批样品，做不同的蛋白也会有这样的情况，发生这种情况的时候3个抗体一起发生，正常的话就一起正常。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2022-01-26 10:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘楠楠05

新虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 上善若水白杨 at 2022-01-26 10:18:23
这两个图是同一批样品做的，同一批样品，条件都一样的情况下，就会有这两种情况。并且同一批样品，做不同的蛋白也会有这样的情况，发生这种情况的时候3个抗体一起发生，正常的话就一起正常。
...

没见过这种情况，样本降解的可能性大，建议问技术，或者换抗体

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2022-01-26 11:14:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
yongde4楼
2022-01-25 18:12   回复  
上善若水白杨(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫Android客户端
tzynew2楼
2022-01-25 17:32   回复  
上善若水白杨(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
Silence_925楼
2022-01-25 18:17   回复  
上善若水白杨(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
花小花?3楼
2022-01-25 18:11   回复  
上善若水白杨(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫Android客户端
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭