24小时热门版块排行榜    

查看: 1417  |  回复: 9

是科研小迷糊呀

金虫 (小有名气)


已领完
WB时,上方时常出现非特异性条带
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫,下载小木虫客户端

问题描述:WB相关问题!!!
最近一直在做WB,但是出现一个不正常的情况,前面验证抗体的时候,抗体是比较好的,但是后面正式开始实验的时候,在目的条带的上方总是出现一个非特异性条带,并且颜色很深,后面重复几次之后,发现同一批蛋白样品有时出现这样的情况,有时会恢复正常,且同一批做的其他的抗体也会同时出现这种现象(正常的时候都正常,不出现上线的带,不正常的时候都不正常,所有抗体上面都出现一条带。
请大家帮帮忙,困扰了很久的问题,谢谢!

WB时,上方时常出现非特异性条带


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘楠楠05

新虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你正常情况下,也是三条带,只是最上面那个带弱,说明抗体是能敷出这个带,是多克隆抗体吧?你说的非正常条带是最上面那个杂带很亮,是蛋白裂解问题,还是蛋白降解问题?下次注意细胞裂解和降解问题,同时可以试试把这个杂带跑分开,剪掉。

发自小木虫Android客户端
6楼2022-01-25 19:38:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

是科研小迷糊呀

金虫 (小有名气)


引用回帖:
6楼: Originally posted by 刘楠楠05 at 2022-01-25 19:38:21
你正常情况下,也是三条带,只是最上面那个带弱,说明抗体是能敷出这个带,是多克隆抗体吧?你说的非正常条带是最上面那个杂带很亮,是蛋白裂解问题,还是蛋白降解问题?下次注意细胞裂解和降解问题,同时可以试试把 ...

这两个图是同一批样品做的,同一批样品,条件都一样的情况下,就会有这两种情况。并且同一批样品,做不同的蛋白也会有这样的情况,发生这种情况的时候3个抗体一起发生,正常的话就一起正常。

发自小木虫Android客户端
7楼2022-01-26 10:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuaibia6

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我对wb不是很了解,但是从PAGE胶图来看造成这种现象的原因应该是这2次电泳的迁移速率不一样,导致胶图呈现不一样的效果。
8楼2022-01-26 11:11:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘楠楠05

新虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 上善若水白杨 at 2022-01-26 10:18:23
这两个图是同一批样品做的,同一批样品,条件都一样的情况下,就会有这两种情况。并且同一批样品,做不同的蛋白也会有这样的情况,发生这种情况的时候3个抗体一起发生,正常的话就一起正常。
...

没见过这种情况,样本降解的可能性大,建议问技术,或者换抗体

发自小木虫Android客户端
9楼2022-01-26 11:14:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

是科研小迷糊呀

金虫 (小有名气)


引用回帖:
8楼: Originally posted by shuaibia6 at 2022-01-26 11:11:04
我对wb不是很了解,但是从PAGE胶图来看造成这种现象的原因应该是这2次电泳的迁移速率不一样,导致胶图呈现不一样的效果。

谢谢你,我也一直在考虑胶的问题,因为WB需要有浓缩胶和分离胶,小电压跑过浓缩胶,再大一些电压跑分离胶。会不会是浓缩胶做的太长,导致大电压下跑浓缩胶,而有一部分进入了分离胶,这样造成了蛋白分离了,一部分在上一部分在下。

发自小木虫Android客户端
10楼2022-01-26 20:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
tzynew2楼
2022-01-25 17:32   回复  
上善若水白杨(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
2022-01-25 18:11   回复  
上善若水白杨(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫Android客户端
yongde4楼
2022-01-25 18:12   回复  
上善若水白杨(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫Android客户端
2022-01-25 18:17   回复  
上善若水白杨(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 是科研小迷糊呀 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 18/900 2026-08-21 13:46 by 医学老男孩
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见