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wangnanyc

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】求助:反相柱的具体操作和注意的细节

问一下反相柱装柱,上样,洗脱剂比例,接样等等的具体操作及注意的细节有什么啊,有经验的高手给说说吧 谢谢哦
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革命尚未成功
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wjyyh1983

金虫 (小有名气)

★ ★
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wingcat(金币+1):谢谢
如果做得是液相色谱的话,你还会装柱?太厉害了,上样前样品溶解最好是用流动相溶解,洗脱比例那要看你自己样品的极性,有时可以适当加酸加碱调节PH,接样参考分析谱图
4楼2009-08-28 10:00:48
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左李菲子

金虫 (小有名气)


wingcat(金币+1):谢谢
主要看你的样品,洗脱剂比例要自己摸索,注意用完后要用100%的乙腈洗
2楼2009-08-28 08:23:17
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chinabull

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
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wingcat(金币+1):谢谢
看看液相色谱方面的书,里面都有详细的说明的。
3楼2009-08-28 08:42:32
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

★ ★
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wingcat(金币+1):谢谢
1.按柱子时候看好柱子上的方向就好了,不过要拧紧,要不然会漏液
2.流动相比例一般的样品都会有标准可查,或者在网上搜搜就会有,当然有很多查不到的,那就需要你自己摸索了。基本上先是用甲醇和水调节比例来改善分离度,如果峰形不好就需要调节PH或加入缓冲盐了。不过如果冲含有缓冲盐的流动相前要先用滤过超过的水将柱子内的甲醇或乙腈冲出来,不然缓冲盐就有可能在甲醇或乙腈中析出,对柱子有损害。
3.进样量不要太大也不要太小,太小很多含量低的成分显不出来。
4.紫外检测器波长选择问题:如果要分离含有很多成分的混合样,就要知道每种成分的紫外最大吸收波长,然后综合考虑选择合适的波长。
药物合成
5楼2009-08-28 11:04:59
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