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狮子美

铁虫 (正式写手)

[求助] PCR阴性跑出条带 已有4人参与

做PCR时,做的阴性对照(未加模板)总是能跑出条带,换了酶,引物,水,枪头,PCR管,还是会出现。请问还应该考虑哪些因素,该如何解决?
PCR扩增的是细菌的16S
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elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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狮子美: 金币+50, ★★★很有帮助 2022-01-13 23:19:45
阴性对照有条带,气溶胶污染的几率很高,估计你们经常扩增这个区域!
更换扩增区域,重新设计合成引物可以最大程度避免你的污染情况,
16楼2022-01-11 15:05:45
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xiao7270

至尊木虫 (著名写手)

看产物大小,可能扩增的是引物对二聚体

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2楼2022-01-08 13:49:23
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狮子美

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiao7270 at 2022-01-08 13:49:23
看产物大小,可能扩增的是引物对二聚体

产物和目标产物一样大

发自小木虫Android客户端
3楼2022-01-08 14:25:31
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狮子美

铁虫 (正式写手)

1和2阴性对照,3和4目标产物
PCR阴性跑出条带



发自小木虫Android客户端
4楼2022-01-08 14:26:24
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