24小时热门版块排行榜    

查看: 542  |  回复: 1
【悬赏金币】回答本帖问题,作者蚝油生菜将赠送您 5 个金币

蚝油生菜

新虫 (小有名气)

[求助] 基因克隆的引物设计问题

新人求助,我要在提出来的全DNA组中克隆出一段目的基因,然后连接到质粒上,我在primer 5上设计的一对引物两边直接加上了酶切位点,然后就p不出来条带了,请问应该如何解决
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛奶糖

新虫 (初入文坛)

可以试试先不加酶切位点扩增连到T载体上,再以质粒为模板用带酶切位点的引物扩增然后连目的载体;但是要注意T载体和目的载体的抗性尽量选择不同抗性,这样可以避免切胶回收这一步

发自小木虫IOS客户端
2楼2022-01-07 11:57:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蚝油生菜 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然青年基金,1A4B能上会吗?青年和面上的上会标准是一样的吗? +7 今晚推荐22 2024-06-20 10/500 2024-06-21 09:25 by liliwang215
[硕博家园] 怎么带研究生? +13 豆豆小小2 2024-06-20 13/650 2024-06-21 09:21 by 娴静
[博后之家] 在国内某高校做全职博士后2年,现在找到新的单位,出站或退站对新工作有什么影响? +6 nxplfcc 2024-06-20 6/300 2024-06-21 09:06 by cuan118
[考博] 这个博士要读吗 +15 Sea Breeze 2024-06-16 30/1500 2024-06-21 09:00 by Xiaolin81
[基金申请] 国产期刊影响因子大于12的有20多个个了 +10 babu2015 2024-06-20 10/500 2024-06-21 08:35 by 钢镚123
[有机交流] 有机反应 50+3 雨中的红玫瑰 2024-06-19 5/250 2024-06-21 08:30 by hptianyan
[有机交流] 锌粉还原反应 20+3 明宝栋 2024-06-17 5/250 2024-06-21 08:26 by hptianyan
[论文投稿] 求机械类四区sci推荐 5+4 迷茫小旷 2024-06-14 8/400 2024-06-21 08:22 by lizhengke06
[精细化工] 试剂价格 +7 旭必上岸 2024-06-17 10/500 2024-06-20 23:35 by 相与处于陆的鱼
[论文投稿] Pattern Recognition期刊,二审审稿邀请发出一个月了,但有一个审稿人一直未接受审稿 5+3 PLVS_VLTRA 2024-06-19 5/250 2024-06-20 22:54 by holypower
[基金申请] 江南大学到瑞士招聘,称取消非升即走,改预聘+长聘 +21 babu2015 2024-06-18 23/1150 2024-06-20 18:25 by zpv2011
[有机交流] 求助 10+5 脂质纳米粒 2024-06-20 6/300 2024-06-20 17:16 by czyzsu
[基金申请] 青年基金会评专家到底是怎么会评的呀?主审专家是不是一般不会改动系统按函评给的顺序 5+4 他山攻玉之石 2024-06-18 18/900 2024-06-20 16:33 by 他山攻玉之石
[有机交流] 怎么萃取出锡盐内包裹的化合物 +3 硕六过 2024-06-19 4/200 2024-06-20 15:45 by 2461777831
[催化] 镍负载氧化铝的保存问题 8+3 lwn0130 2024-06-15 6/300 2024-06-20 09:00 by lwn0130
[基金申请] F口信息学部拿面上,大概需要什么样的成果 +7 _奋黎_ 2024-06-16 18/900 2024-06-19 20:02 by _奋黎_
[基金申请] 面上博士后 +3 jsqy 2024-06-19 3/150 2024-06-19 17:58 by bxwisdom_886
[高分子] 寻找聚酯反应釜 +3 茕茕恭煮 2024-06-15 6/300 2024-06-18 14:15 by 茕茕恭煮
[硕博家园] 博士毕业高校和就业的相关问题 +7 SCITOPPP 2024-06-14 11/550 2024-06-18 07:51 by yinxing1995
[基金申请] 面青地会评时间 +8 tanjydd 2024-06-15 8/400 2024-06-17 17:08 by 小龙虾2008
信息提示
请填处理意见