应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白提取的问题
81/1返回列表
查看: 801  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

空盖子

铜虫 (初入文坛)

[交流] 蛋白提取的问题

大家好，我提取蛋白的方法是  收集菌体，然后加蛋白提取液煮沸10分钟，然后离心，收集上清，请问，上清液是菌体所有的蛋白吗，沉淀里有蛋白吗，如果菌体有包涵体的话，会在沉淀里吗，那如果在我该怎么处理呢？？
  在书上看，将上清和沉淀都跑电泳，但是沉淀我该怎么溶解呢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-08-26 12:47:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

franciszjm

金虫 (初入文坛)
你怎么还要煮沸的 ？ 什么酶啊？
赞一下 回复此楼
2楼2009-08-26 13:11:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baisuilan

金虫 (正式写手)
要加上样缓冲液再煮啊。蛋白质会和SDS结合的。如果有包涵体的话，可以用8M尿素溶解之后再煮。不过直接加上样缓冲液，煮完离心取上清跑电泳也可以的。
赞一下 回复此楼
3楼2009-08-26 13:13:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baisuilan

金虫 (正式写手)
还有，用溶菌酶或者超声裂解的话，直接离心，上清里是可溶部分，沉淀里有包涵体啊细胞碎片阿什么的，不可以没加上样缓冲液就煮的，会把蛋白煮降解的
赞一下 回复此楼
4楼2009-08-26 13:15:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leirihua

铜虫 (小有名气)
你说的是细菌吗，假如是就不行，煮沸根本不能破坏其细胞壁。可以先用酶处理--再过滤——
赞一下 回复此楼
5楼2009-08-26 14:23:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空盖子

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by baisuilan at 2009-8-26 13:13:
要加上样缓冲液再煮啊。蛋白质会和SDS结合的。如果有包涵体的话，可以用8M尿素溶解之后再煮。不过直接加上样缓冲液，煮完离心取上清跑电泳也可以的。

我的蛋白提取液里就有上样缓冲液，这样煮的话，包涵体也会溶解吗？？还是在沉淀里呢
赞一下 回复此楼
6楼2009-08-27 13:46:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空盖子

铜虫 (初入文坛)
还有请问  8M的尿素怎么配置啊
赞一下 回复此楼
7楼2009-08-27 13:53:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
引用回帖:
Originally posted by 空盖子 at 2009-8-27 13:53:
还有请问  8M的尿素怎么配置啊

尿素的分子量有，然后乘8 ，称量这么多克，去离子水定容到1L。
赞一下 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
8楼2009-08-27 14:28:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 空盖子 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:41 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:08 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭