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pnpp法测脂肪酶活性
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1、ph=8的tris-hcl缓冲液的配制：6.05g tris 置于 1l 烧杯中，去离子水溶解，加入 0.1%阿拉伯树胶粉（1g）、0.2%脱氧胆酸钠（2g），配置成 50mmol/l ph 8.0 的tris‐hcl缓冲液。（溶液浑浊）不加脱氧胆酸钠溶液澄清。 2、胰脂肪酶溶液：tris‐hcl 缓冲液溶解 0.25g 胰脂肪酶，混匀静置，5 000r/min 离心 5min，取上清液，配成 1.2mg/ml 胰脂肪酶溶液（ppl），‐20℃保存。 3、底物溶液：4‐硝基苯棕榈酸酯（pnpp）20mg 溶5ml异丙醇，再用 tris‐hcl 缓冲液定容到100ml。（溶液变浑浊）加入曲拉通-100，浑浊显现未改变。 4、底物溶液：4‐硝基苯棕榈酸酯（pnpp）2mg 溶10ml异丙醇。超声15min，溶液变成澄清，加入酶液后，变浑浊。 想请教一下相关科研领域的大神们，有没有做过相关实验，浑浊是怎么回事，该怎么解决，pnpp法测脂肪酶活性实验中要注意哪些细节，（附件图片是参考文献操作）已经试了好长时间了，急求帮助，谢谢！  发自小木虫Android客户端 |
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