| 查看: 4641 | 回复: 8 | |||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者丫星空丫将赠送您 30 个金币 | |||
[求助]
pnpp法测脂肪酶活性
|
|||
|
1、ph=8的tris-hcl缓冲液的配制：6.05g tris 置于 1l 烧杯中，去离子水溶解，加入 0.1%阿拉伯树胶粉（1g）、0.2%脱氧胆酸钠（2g），配置成 50mmol/l ph 8.0 的tris‐hcl缓冲液。（溶液浑浊）不加脱氧胆酸钠溶液澄清。 2、胰脂肪酶溶液：tris‐hcl 缓冲液溶解 0.25g 胰脂肪酶，混匀静置，5 000r/min 离心 5min，取上清液，配成 1.2mg/ml 胰脂肪酶溶液（ppl），‐20℃保存。 3、底物溶液：4‐硝基苯棕榈酸酯（pnpp）20mg 溶5ml异丙醇，再用 tris‐hcl 缓冲液定容到100ml。（溶液变浑浊）加入曲拉通-100，浑浊显现未改变。 4、底物溶液：4‐硝基苯棕榈酸酯（pnpp）2mg 溶10ml异丙醇。超声15min，溶液变成澄清，加入酶液后，变浑浊。 想请教一下相关科研领域的大神们，有没有做过相关实验，浑浊是怎么回事，该怎么解决，pnpp法测脂肪酶活性实验中要注意哪些细节，（附件图片是参考文献操作）已经试了好长时间了，急求帮助，谢谢！  发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
自荐读博
已经有3人回复
-
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有5人回复
-
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有22人回复
-
不自信的我
已经有5人回复
-
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有4人回复
-
投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球
已经有8人回复
|
是的，我的也是一直混浊，感觉像底物不溶于体系，实验一直失败，换了底物4-对硝基苯丁酸酯，现用现配，但是黄色会一直加深，吸光值一直变大，奥利司他根本测不出阳性对照 发自小木虫Android客户端 |
2楼2021-12-16 18:36:43
3楼2021-12-23 09:41:24
4楼2022-01-05 19:58:30
-Silence..
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 129.4
- 散金: 5
- 帖子: 52
- 在线: 2.3小时
- 虫号: 27831159
- 注册: 2021-11-27
- 性别: MM
- 专业: 食品加工技术
5楼2022-05-07 00:44:20
6楼2022-11-17 10:40:22
7楼2022-12-01 10:25:05
8楼2023-02-19 15:35:04
9楼2025-08-15 10:36:00