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水溶C100pro

新虫 (小有名气)

[求助] 关于血清瓶中培养基灭菌的几个问题 已有1人参与

关于液体培养基养厌氧菌的几个求助问题:
前提:因为是厌氧操作,所以准备用100mL血清瓶,培养基100mL,接种污泥5mL.培养基我分了母液A、B和C、D,A、B浓缩了10倍,需要高压灭菌。C、D浓缩了100倍,需要过滤灭菌,培养基的pH要调至7左右。(之前完全没接触过微生物实验,师兄师姐也没进行过厌氧培养基的灭菌)
①高压灭菌过程中我需要只在血清瓶中分别加母液A、B 10mL,进行高压灭菌,还是加A、B和80mL纯水。加了水我害怕血清瓶装的太满了,在灭菌过程中有隐患。但是不加水的话要将水单独灭菌,那么需要在哪里将水转移至血清瓶中才能保证不染菌呢?另外高压灭菌后的后续操作要在哪里进行,比如后续加过滤灭菌的母液C、D在哪里进行(超净台?生物安全柜?
②血清瓶在灭菌过程中需要用橡胶塞和铝盖密封吗?密封的话感觉高压蒸汽进不去,不密封的话要怎么弄咧?
③培养基最后要调pH,血清瓶瓶口很小,pH计插不进去要怎么测pH?
感谢各位老板,祝各位早日发财!救救小白吧
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

血清瓶不能高压灭菌。
一般是环氧乙烷灭菌。
生物资源交流QQ群:1044518333
6楼2021-12-31 17:53:33
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heray22

新虫 (正式写手)

要密封灭菌,体积不要超过容积的2/3,在1/3~1/2最佳

发自小木虫Android客户端
2楼2021-12-06 15:23:41
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heray22

新虫 (正式写手)

3楼2021-12-06 15:24:07
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heray22

新虫 (正式写手)

厌氧步骤:配好培养基,调好pH,封口 氮气吹,加刃天青厌氧指示剂,吹到厌氧从蓝色变粉红色到无色,边氮吹边分装到血清瓶,加橡胶塞铝箔盖密封,然后去灭菌。后面加药剂用一次性注射器加,

发自小木虫Android客户端
4楼2021-12-06 15:27:25
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