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水溶C100pro新虫 (小有名气)
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[求助]
关于血清瓶中培养基灭菌的几个问题 已有1人参与
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关于液体培养基养厌氧菌的几个求助问题： 前提：因为是厌氧操作，所以准备用100mL血清瓶，培养基100mL,接种污泥5mL.培养基我分了母液A、B和C、D,A、B浓缩了10倍，需要高压灭菌。C、D浓缩了100倍，需要过滤灭菌，培养基的pH要调至7左右。（之前完全没接触过微生物实验，师兄师姐也没进行过厌氧培养基的灭菌） ①高压灭菌过程中我需要只在血清瓶中分别加母液A、B 10mL，进行高压灭菌，还是加A、B和80mL纯水。加了水我害怕血清瓶装的太满了，在灭菌过程中有隐患。但是不加水的话要将水单独灭菌，那么需要在哪里将水转移至血清瓶中才能保证不染菌呢？另外高压灭菌后的后续操作要在哪里进行，比如后续加过滤灭菌的母液C、D在哪里进行（超净台？生物安全柜？ ②血清瓶在灭菌过程中需要用橡胶塞和铝盖密封吗？密封的话感觉高压蒸汽进不去，不密封的话要怎么弄咧？ ③培养基最后要调pH，血清瓶瓶口很小，pH计插不进去要怎么测pH？ 感谢各位老板，祝各位早日发财！救救小白吧 |
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2楼2021-12-06 15:23:41
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3楼2021-12-06 15:24:07
heray22
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厌氧步骤：配好培养基，调好pH，封口 氮气吹，加刃天青厌氧指示剂，吹到厌氧从蓝色变粉红色到无色，边氮吹边分装到血清瓶，加橡胶塞铝箔盖密封，然后去灭菌。后面加药剂用一次性注射器加， 发自小木虫Android客户端 |
4楼2021-12-06 15:27:25
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