24小时热门版块排行榜    

查看: 1566  |  回复: 7
【悬赏金币】回答本帖问题,作者果茶屁将赠送您 5 个金币

果茶屁

新虫 (初入文坛)

[求助] 载体构建 已有2人参与

做载体构建的时候,酶切和PCR都验证过了,对的,为什么送测序的时候,测序的结果都不对,一直想不明白

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuaibia6

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的目的片段没有完全结合在载体上。你的目的片段是不是偏大载体偏小
2楼2021-11-25 10:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longanzz

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR是用什么引物做的,是基因引物吗?最好再用载体引物和基因引物搭配扩增,如果有带,那还差不多链接上了。
3楼2021-11-25 11:46:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangcarlm

木虫 (著名写手)

选一段目的片段中间位置的序列做引物,做测序。

发自小木虫Android客户端
4楼2021-11-25 12:21:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

果茶屁

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shuaibia6 at 2021-11-25 10:29:59
你的目的片段没有完全结合在载体上。你的目的片段是不是偏大载体偏小

目的基因1800bp,载体是一万多bp

发自小木虫Android客户端
5楼2021-11-25 14:33:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

果茶屁

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by longanzz at 2021-11-25 11:46:33
PCR是用什么引物做的,是基因引物吗?最好再用载体引物和基因引物搭配扩增,如果有带,那还差不多链接上了。

pcr用的克隆时的引物验证的

发自小木虫Android客户端
6楼2021-11-25 14:34:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

果茶屁

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangcarlm at 2021-11-25 12:21:11
选一段目的片段中间位置的序列做引物,做测序。

我去试一下,谢谢啦

发自小木虫Android客户端
7楼2021-11-25 14:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tjj451679479

新虫 (小有名气)

我纯粹凑个热闹,扩培构建好的载体,提取质粒后直接切下目的片段送测序。
8楼2021-11-25 16:46:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 果茶屁 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
信息提示
请填处理意见