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greatsaint

银虫 (小有名气)

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[交流] 质粒载体双酶切无条带是何原因

目前已将目的片段连接到了质粒载体上，用原引物检测得到了目的条带。现在双酶切质粒却没有条带是什么原因呢？反应体系是20μl，质粒DNA1μl，反应5h。电泳后什么也看不到。是上样量的问题吗？

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1楼 2009-08-24 20:19:58

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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)

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amisking(金币+2,VIP+0): 10-7 16:53

质粒DNA1μl的量太少了，你的双酶切的效率是多高啊，这么少的模板量在20μl体系里再去其中的一点电泳可能什么都看不见

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4楼2009-08-24 20:46:30

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beisimai895

木虫 (小有名气)

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amisking(金币+2,VIP+0): 10-7 16:53

你可以将质粒的量再多加一些,会不会是质粒的量太少,电泳检测不出,又或者是又酶切,那你的buffer 用对了吗?

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2楼2009-08-24 20:24:29

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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

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★
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可能性非常大，越短的片段越看不清楚

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3楼2009-08-24 20:24:37

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baiyidao

金虫 (小有名气)

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★
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酶切BUFFER最重要，酶的储藏条件,

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5楼2009-08-24 20:49:46

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