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冷月5565木虫 (职业作家)
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[交流]
关于AflII酶切屡次不成功的原因
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我近期用宝生物（大连）生产的AflII对一个有插入片段的pMD8-T质粒做单酶切。而且酶切片段混乱。 AflII酶切位点在插入片段上，插入片段约200bp，插入于EcoRV克隆位点上。 所用Buffer为百分之0.1BSA和10XM。 请问列位专家有没有类似经历？能否帮我分析原因？ [ Last edited by 冷月5565 on 2009-8-24 at 13:43 ] |
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冷月5565
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3楼2009-08-24 17:46:35
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是18T吧？。。切你的片段切不开就是你片段的问题，换个载体切切看看是不是你的片段的问题咯。。也可以换个切点看看，或者换个批次的酶（换好点的酶比如NEB的也行）
。。。多多做尝试总能成功的
酶切切不动很正常的。。一般最好是曲线救国，达到目的就行了，强搞就算成功了也很费的
5楼2009-08-24 18:53:19