| 查看: 860 | 回复: 7 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
冷月5565木虫 (职业作家)
|
[交流]
关于AflII酶切屡次不成功的原因
|
||
|
我近期用宝生物（大连）生产的AflII对一个有插入片段的pMD8-T质粒做单酶切。而且酶切片段混乱。 AflII酶切位点在插入片段上，插入片段约200bp，插入于EcoRV克隆位点上。 所用Buffer为百分之0.1BSA和10XM。 请问列位专家有没有类似经历？能否帮我分析原因？ [ Last edited by 冷月5565 on 2009-8-24 at 13:43 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
资源与环境 调剂申请(333分)
已经有7人回复
-
306求0703调剂一志愿华中师范
已经有11人回复
-
【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂
已经有14人回复
-
0703化学调剂，求导师收
已经有6人回复
-
求调剂
已经有5人回复
-
070300化学求调剂
已经有9人回复
-
300分，材料，求调剂，英一数二
已经有3人回复
-
材料学硕，求调剂
已经有7人回复
-
289求调剂
已经有5人回复
-
求调剂
已经有7人回复
ljsh
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 9615.6
- 红花: 1
- 帖子: 1836
- 在线: 382.1小时
- 虫号: 152856
- 注册: 2006-01-02
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
2楼2009-08-24 16:38:45
冷月5565
木虫 (职业作家)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 3273.6
- 散金: 576
- 红花: 38
- 沙发: 1
- 帖子: 3554
- 在线: 826.2小时
- 虫号: 578811
- 注册: 2008-07-04
- 性别: GG
- 专业: 原始宗教
3楼2009-08-24 17:46:35
brightfuture01
木虫之王 (文坛精英)
我爱打老虎
- BioEPI: 8
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 1.2
- 金币: 113363
- 散金: 1526
- 红花: 224
- 沙发: 1
- 帖子: 28943
- 在线: 3685小时
- 虫号: 464575
- 注册: 2007-11-21
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
4楼2009-08-24 18:09:52
gogen
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1335.9
- 红花: 2
- 帖子: 160
- 在线: 66小时
- 虫号: 589241
- 注册: 2008-08-29
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
是18T吧？。。切你的片段切不开就是你片段的问题，换个载体切切看看是不是你的片段的问题咯。。也可以换个切点看看，或者换个批次的酶（换好点的酶比如NEB的也行）
。。。多多做尝试总能成功的
酶切切不动很正常的。。一般最好是曲线救国，达到目的就行了，强搞就算成功了也很费的
5楼2009-08-24 18:53:19
冷月5565
木虫 (职业作家)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 3273.6
- 散金: 576
- 红花: 38
- 沙发: 1
- 帖子: 3554
- 在线: 826.2小时
- 虫号: 578811
- 注册: 2008-07-04
- 性别: GG
- 专业: 原始宗教
6楼2009-08-24 22:54:39
heismeng
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 898.1
- 散金: 38
- 帖子: 265
- 在线: 24.7小时
- 虫号: 316216
- 注册: 2007-03-03
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
7楼2009-08-25 08:50:16
mimisikai
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 4928.1
- 散金: 167
- 红花: 1
- 帖子: 116
- 在线: 18.4小时
- 虫号: 433549
- 注册: 2007-08-18
- 专业: 疫苗学
8楼2009-08-25 09:12:04
6