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EMSA验证-蛋白与探针结合条带弥散 已有1人参与
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大家好，我最近做一个调控子与基因启动子之间的相互作用，EMSA验证。现在纯化了蛋白，与荧光标记探针作用，通过提高蛋白浓度发现其与基因有结合，但结合条带非常弥散，有没有能帮我看看怎么回事?我已经优化了binding 条件，但是条带还是弥散。蛋白是加入了ul，不是ml。且蛋白浓度是2.1mg/ml。 发自小木虫Android客户端 |
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聆蝶漫澄
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2楼2021-10-21 15:15:09
pennchem
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3楼2021-10-21 16:47:00
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你好，请问你解决你的问题了吗，我最近也在做这个，但是我加了蛋白的组连条带都没有，用的6%的非变性胶，1×tbe，我的蛋白pi是5.7，是不是因为蛋白被卡主了，跑不出来，还是有其他的什么问题 发自小木虫Android客户端 |
4楼2022-03-08 22:15:21
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请问，我的蛋白pi是5.7，做emsa，用的1×tbe，缓冲液，跑完后，只有没有加蛋白的有条带，加蛋白的没有条带，或者是弥散的条带（很不清楚），这个是因为我缓冲液PH的问题吗，但我又看网上说，不需要考虑蛋白pi，是的吗？ 发自小木虫Android客户端 |
5楼2022-03-08 22:18:21
弋?V?U
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6楼2022-03-13 02:32:49