24小时热门版块排行榜

返回列表

当前主题已经存档。

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lanlan1119

金虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 444.8
散金: 27
帖子: 244
在线: 29.7小时
虫号: 584081
注册: 2008-08-01
性别: MM
专业: 色谱分析

[交流] 关于考马斯亮兰法测定蛋白质

我用考马斯亮兰法测蛋白含量时，做标准曲线用的G-球蛋白溶液（1mg/ml）是用纯化水溶解的，得到的标准曲线相关性是0.99947。
但做样品时，样品在纯化水中很难溶解，我用0.5%的碳酸氢钠溶解配制成1mg/ml（空白加入0.1ml的0.5%的碳酸氢钠和5ml的考马斯亮兰，且0.5%的碳酸氢钠在595nm下测紫外吸收为0.001），取0.04ml的样品溶液再用纯化水补充至0.1ml后测定，一共测定了六批样品，得到的蛋白含量都在0.5%左右，而用hplc测得的六批样品纯度都在95%以上，蛋白含量测定值明显偏高。
问题是不是出在标准曲线上啊，因为标准曲线是用纯化水溶解的，而样品测定时是用0.5%的碳酸氢钠溶解的。
请有经验的高手指点

回复此楼

» 猜你喜欢

真诚求助：手里的省社科项目结项要求主持人一篇中文核心，有什么渠道能发核心吗已经有8人回复
寻求一种能扛住强氧化性腐蚀性的容器密封件已经有5人回复
论文投稿，期刊推荐已经有6人回复
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。已经有4人回复
孩子确诊有中度注意力缺陷已经有14人回复
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢已经有5人回复
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗已经有5人回复
2025冷门绝学什么时候出结果已经有3人回复
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入已经有4人回复
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生已经有6人回复

1楼2009-08-20 17:36:00

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

BioEPI: 14
应助: 80 (初中生)
金币: 2277.2
散金: 24
红花: 65
帖子: 6880
在线: 946小时
虫号: 528557
注册: 2008-03-19
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-21 17:49

pH 和反应温度影响考法测定太厉害了！

就是连重复性都做不好的。。。不信，LZ 改个时间再做下标准曲线，会跟原来的又不一样的。

我试过，很不准！
某人所说的每次都做标准曲线标定，这这。。。还叫标准曲线吗？！

建议LZ 改用 Lowry法，以BSA或人血白蛋白做标品！

[ Last edited by HarveyWang on 2009-8-21 at 10:44 ]