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异源表达抗菌蛋白
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通过双酶切，T4酶连的方式，将我的1300多bp的目的片段连上了pet-28a，构建大肠杆菌（BL21）构建重组菌，异源表达大概45kda的抗菌蛋白，然后去跑sds-page发现杂带很少，过镍柱也发现流穿前的破碎上清，蛮干净的，而且用低浓度20，40，60到400的咪?去洗脱，没能洗下来，还有一个现象就是种子液加1%到液体发酵，发现大肠杆菌长得很慢，3小时了菌液都不是很混浊，OD600测了一下在0.2～0.3，就感觉被抑制了。大家是否有碰到这样的现象呢，帮帮我吧，纠结两三个月了！图中从第2泳道起分别是流穿，20，40，60，80，100，200，400梯度洗脱。 发自小木虫IOS客户端 |
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