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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于提取质粒问题
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忘记将来

木虫 (正式写手)
★
菊花茶(金币+1):谢谢参与
以前出现过差不多的现象，老师说可能有RNA，或者DNA不纯，现在用试剂盒很方便，
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21楼2009-08-18 21:02:03
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lzhaowin

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该是质粒降解了，估计楼主在基因组变性和质粒复性这两步中振荡过猛了，应该温和一点~
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22楼2009-08-19 00:03:47
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feitiannongying

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你这个情况应该是质粒提的不好。根据楼主的说法我推测你是碱法质粒小量提取，如果这样的话还真不如用试剂盒。我的重组质粒6KB多，试剂盒提的不是很好，所以每次我都用碱法质粒大量提取法，提一次至少6h，很麻烦，不过没办法。楼主可以试一下。
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23楼2009-08-19 07:39:36
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
omega的试剂盒也不错的。
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梦在路就在！
24楼2009-08-19 11:06:04
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anik

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
RNA的消化不够
异丙醇沉淀时未沉淀彻底
最重要的是氯仿抽提这步不能省（酚可以不用），作用是除蛋白
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25楼2009-08-20 07:35:27
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菊花茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by anik at 2009-8-20 07:35:
RNA的消化不够
异丙醇沉淀时未沉淀彻底
最重要的是氯仿抽提这步不能省（酚可以不用），作用是除蛋白

多谢指点，不过我没有用异丙醇沉淀，而是用无水乙醇
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26楼2009-08-20 15:21:06
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我是小梅

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
质粒抽提不好吧，好像都是一些降解的片段，酶切中是不是出了问题
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27楼2009-08-26 15:37:23
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hyh2000518

捐助贵宾 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用kit吧，任何一个国产的都不错
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ITWILLGIVEUTHEWORLD，BUTUMUSTGIVEITYOURSELF
28楼2009-08-26 16:18:19
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冷月5565

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最近有上海申能博彩的代理商搞了个优惠活动，买200赠200.质量一般般，不过我想总比自己制备要好些（推销员说这是专给老客户提供的优惠，我猜他们只是为了让我们老板动心才这样说）。
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29楼2009-08-26 16:28:37
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