24小时热门版块排行榜    

查看: 1678  |  回复: 28
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

菊花茶

木虫 (著名写手)

[交流] 关于提取质粒问题

连接片段的载体PGM-T(天根),感受态细胞DH5α。提取质粒按照《分子克隆实验指南》碱裂解法提取(省去酚:氯仿抽提步骤)。但是用电泳直接检测条带是弥散的(下图),请高手指点哪里出问题了。前几次也是这样,而且酶切检测也是弥散条带。marker:2000,1000,750,500,250,100

电泳条带呈弥散状是什么原因,还有就是弥散带是什么东西?

[ Last edited by 菊花茶 on 2009-8-18 at 16:14 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菊花茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by anik at 2009-8-20 07:35:
RNA的消化不够
异丙醇沉淀时未沉淀彻底
最重要的是氯仿抽提这步不能省(酚可以不用),作用是除蛋白

多谢指点,不过我没有用异丙醇沉淀,而是用无水乙醇
26楼2009-08-20 15:21:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 29 个回答

charlies929

至尊木虫 (正式写手)

没这样提过,都是用Kit的现在很便宜的,生工的就很好用,楼主不妨买个试试
2楼2009-08-18 14:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouzhou_3006

木虫 (著名写手)


菊花茶(金币+1):谢谢参与
建议试剂重新配制或者直接买生工的试剂盒(BBI公司),很便宜的。 marker是正常的说明提取质粒的过程出现了问题。
为梦想努力。
3楼2009-08-18 14:51:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


菊花茶(金币+1):谢谢参与
操作过程中太猛烈了~~~
国产的天根小抽足够满足你的需求了,很便宜~~
4楼2009-08-18 15:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 69/3450 2026-08-16 00:16 by mo_mo_mo_mo
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +9 majunge000 2026-08-11 11/550 2026-08-15 23:20 by botar
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见