应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 求助关于Sephadex G-100纯化的问题
81/1返回列表
查看: 2496  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者予浓123将赠送您 3 个金币

予浓123

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于Sephadex G-100纯化的问题 已有2人参与

求助各位大神，本人现在用Sephadex G-100纯化糖蛋白，刚开始的时候，柱子平衡好之后第一次过柱子峰形正常，第二次跑的峰形就出现杂峰峰形，于是每次灌柱后只跑一次。现在灌好柱子后柱子下出口放低出水，一旦抬高放到收集器上就不怎么流，达不到接收测量的量，不知道问题出现在哪里，希望各位指点一下，感激不尽
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-06-29 09:25:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个树脂应该是可以重复用的，不用每次都灌柱，可以试着用NaOH溶液清洗一下。
关于柱子不流，你是靠重力让流动相流动，还是通过泵施加了压力？如果纯粹靠重力的话，出口管路抬得太高当然就流不出来了，为啥不把接收器放在下面呢？
赞一下(1人) 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-06-29 09:41:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

予浓123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-06-29 09:41:44
这个树脂应该是可以重复用的，不用每次都灌柱，可以试着用NaOH溶液清洗一下。
关于柱子不流，你是靠重力让流动相流动，还是通过泵施加了压力？如果纯粹靠重力的话，出口管路抬得太高当然就流不出来了，为啥不把接收 ...

谢谢你的回复，很感谢，我加了个蠕动泵为了可以自动走流动相，难道不是通过泵调流速吗？什么时候要考虑接收器的位置呢？接收器目前和其他仪器一样放在试验台上
赞一下 回复此楼
3楼2021-06-29 19:23:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
引用回帖:
3楼: Originally posted by 予浓123 at 2021-06-29 19:23:57
谢谢你的回复，很感谢，我加了个蠕动泵为了可以自动走流动相，难道不是通过泵调流速吗？什么时候要考虑接收器的位置呢？接收器目前和其他仪器一样放在试验台上...

不太理解你用的体系是什么样子。建议要么连用hplc，用hplc的高压泵。要么就简易的方法，填个开放式的小柱子竖着放，靠重力让液体留下来。
hplc高压蠕动泵压力足够高的话，总归是能流的呀。除非你的柱子堵了，那就要用NaOH等清洗，保存柱子的时候用20%乙醇，防止里面长菌。
赞一下(1人) 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-06-29 20:14:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

予浓123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-06-29 20:14:47
不太理解你用的体系是什么样子。建议要么连用hplc，用hplc的高压泵。要么就简易的方法，填个开放式的小柱子竖着放，靠重力让液体留下来。
hplc高压蠕动泵压力足够高的话，总归是能流的呀。除非你的柱子堵了，那就 ...

链接: https://pan.baidu.com/s/1URQcfk5WHERXQxxdcNbJ0Q 提取码: mp4c 复制这段内容后打开百度网盘手机App，操作更方便哦
装置是这样的，麻烦您帮我康康，谢谢您
赞一下 回复此楼
5楼2021-06-29 22:39:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★
予浓123: 金币+2, ★有帮助, 好的，我试试，感谢您的帮助解答 2021-06-30 09:34:58
引用回帖:
5楼: Originally posted by 予浓123 at 2021-06-29 22:39:38
链接: https://pan.baidu.com/s/1URQcfk5WHERXQxxdcNbJ0Q 提取码: mp4c 复制这段内容后打开百度网盘手机App，操作更方便哦
装置是这样的，麻烦您帮我康康，谢谢您...

目测你用的这个蠕动泵是那种劲儿比较小的，压力不太够用。但是靠重力应该是可以流下来的，只要你把上液面和下面出口的垂直距离设置得足够高，P=ρgh，压强就是和两个液面垂直距离成正比。你现在液体的入口和出口都摆在桌子上处于同一水平面，所以自然就没压力了。找个架子把进样buffer的瓶子放在最上面，然后把接收器放地上。
这种树脂就是流得比较慢，流速能到0.5ml/min就够用了。
赞一下(1人) 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
6楼2021-06-30 08:54:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我只能说这个胶很软，不好装柱，反压也挺大
赞一下 回复此楼
7楼2021-06-30 16:40:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

予浓123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by walking dead at 2021-06-30 16:40:28
我只能说这个胶很软，不好装柱，反压也挺大

同感哈哈
回复此楼
8楼2021-07-02 08:27:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 予浓123 的主题更新
81/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 313求调剂 +4 一朵人头 2026-03-04 4/200 2026-03-10 23:05 by Equinoxhua
[考研] 哈工大材料324求调剂 +6 闫旭东 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:49 by 星空星月
[考研] 327求调剂 +3 Ffff03 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:30 by macy2011
[考研] 08工科 +5 li李乐成 2026-03-06 5/250 2026-03-10 14:51 by 在风落中
[考研] 310 070300化学求调剂 +4 扑风铃的猫 2026-03-08 5/250 2026-03-09 19:46 by 30660438
[考研] 0703求调剂 +10 c297914 2026-03-06 11/550 2026-03-09 18:37 by 30660438
[考研] 材料调剂 +4 xxxcm 2026-03-08 7/350 2026-03-09 10:11 by EBSD
[考研] 337求调剂 +3 睡醒，。 2026-03-09 3/150 2026-03-09 10:02 by 求调剂zz
[考研] 290 材料与化工求调剂 +7 Nebulala 2026-03-08 7/350 2026-03-09 05:21 by houyaoxu
[考研] 理学287分求调剂 +4 看看我. 2026-03-05 4/200 2026-03-08 22:11 by qingfeng258
[考研] 301求调剂 +11 朝天椒的双马尾 2026-03-05 11/550 2026-03-08 21:50 by 知足常乐的乐
[考研] 求调剂 +3 拾柒12。 2026-03-08 3/150 2026-03-08 17:33 by bingxueer79
[考研] 求调剂，一志愿华中科大0702，数一英一，293 +4 小罗露一二 2026-03-07 4/200 2026-03-08 16:36 by 星空星月
[考研] 材料科学（0805）338 求调剂 +7 xiaokang3286 2026-03-07 7/350 2026-03-08 03:42 by lfhuang
[考研] 301求调剂 +5 一二LV 2026-03-07 5/250 2026-03-07 22:20 by 18137688336
[考研] 材料调剂 +10 ounce. 2026-03-04 12/600 2026-03-07 09:14 by Mornach1988
[考研] 308求调剂 +7 倘若起风了呢 2026-03-05 9/450 2026-03-06 22:59 by 倘若起风了呢
[考研] 材料考研339求调剂 +3 Karry*^_^* 2026-03-04 3/150 2026-03-06 00:32 by wutongshun
[考研] 274环境工程求调剂 +6 扶柳盈江 2026-03-05 6/300 2026-03-05 13:16 by 梦天888
[考研] 一志愿西交大材料学硕 346 求调剂 +3 zju51 2026-03-04 3/150 2026-03-04 13:01 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭