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775988

新虫 (初入文坛)

[交流] 有大神知道乳糖操纵子模型相较基因敲除的好处吗 已有2人参与

看文献,作者研究一个蛋白对病毒滴度的影响,选择将基因插入到乳糖操纵子模型中,通过IPTG选择性的表达,他为什么不把这段基因直接敲除呢?

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正清哲和

至尊木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 775988 at 2021-06-02 11:29:54
乳糖操纵子在未诱导的情况下还是有一个较低水平的表达量的

可以在培养基中加入葡萄糖,抑制lac promoter。
对他人,可以善待、珍重,但无需寄以厚望,依旧充满感激 ,做好自己!
4楼2021-07-11 10:54:34
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775988

新虫 (初入文坛)

乳糖操纵子在未诱导的情况下还是有一个较低水平的表达量的

发自小木虫Android客户端
2楼2021-06-02 11:29:54
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原海亮

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
问题描述的有点过于简单,这个基因是原宿主细胞内的基因么?构建乳糖操纵子模型里面是指把该基因克隆至带有乳糖操纵子的载体,转化至宿主细胞,增加表达拷贝数么?

猜测,基因敲除的工作量要远远大于简单的载体转化,所以择优选择了后者。

研究一个蛋白对病毒滴度的影响,敲除基因是通过“有”和“无”之间的对比体现实验结果。原宿主细胞内IPTG诱导的方式是通过该蛋白“多”和“少”的变化来验证实验猜想。两种思路其实都可以获得有效的数据。

并且,如果不是在原宿主原位验证,而是异源表达该蛋白来做验证,那么IPTG诱导控制也可以实现“有”和“无”的对比实验效果。
天空才是极限,我有信心飞的更高!
3楼2021-06-03 10:08:30
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