应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » DNA单链退火形成双链
51/1返回列表
查看: 5501  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zzzzz347

新虫 (初入文坛)

[交流] DNA单链退火形成双链 已有6人参与

我自己设计了两条完全互补的DNA单链，用纯水稀释，95℃热激5min，室温退火，通过凝胶电泳验证，发现只能形成很少的双链。但是用同样的操作处理文献中的两条单链DNA，是能够成功合成大量的双链的。有没有大佬知道这是什么问题？
自己在网上尝试了几种退火缓冲，也更改过热激温度，但效果不明显，到现在还是只有极少数的双链，大部分序列还是单链，问题到底出在哪里
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-05-28 16:24:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grm枫

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你设计的片段有自身二聚体产生
赞一下 回复此楼
4楼2021-05-31 13:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你可以问一下合成序列的公司，让他们的销售联系一下技术服务。一般大一点公司都会做这些。
我没做过这个，但是感觉这个要精确控制降温速度吧！降低退火降温速度，试试梯度降温？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2021-05-30 08:10:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BioChen

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
短双链退火是一件很容易的事情，随便做都能成功

长链、高GC含量、有复杂二级结构的，延长高温时间、用PCR仪缓慢降温、加DMSO
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2021-05-30 11:15:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

仰望守护

银虫 (正式写手)
用Unpack模拟分析一下

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2021-07-17 00:46:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288求调剂 +9 王晓阳- 2026-03-09 13/650 2026-03-10 08:59 by Wahxp
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +3 偏振片 2026-03-10 3/150 2026-03-10 07:49 by flyboyflyfly
[考研] 一志愿天津大学，英一数二305分求调剂，四六级已过 +5 小小番的茄 2026-03-09 5/250 2026-03-09 20:01 by 雾散后相遇lc
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
[考研] 348求调剂 +3 wyx79618 2026-03-06 7/350 2026-03-09 16:10 by wyx79618
[考研] 296求调剂 +4 Xinyu Wu311 2026-03-09 4/200 2026-03-09 11:51 by 勇敢太监王公公
[考博] 申博 +5 添菜了哈 2026-03-04 8/400 2026-03-09 10:52 by jamesqi
[考研] 085701环境工程专硕求调剂 +5 幼稚园大班打手 2026-03-08 5/250 2026-03-09 07:07 by houyaoxu
[考研] 一志愿武理314求调剂 +4 （￣～￣;） 2026-03-08 5/250 2026-03-08 23:12 by L135790
[考研] 医学检验专业26考研求调剂 +3 琪ya 2026-03-03 5/250 2026-03-08 22:56 by 清风月
[考研] 334求调剂 +8 Trying] 2026-03-06 8/400 2026-03-08 14:51 by hmn_wj
[考研] 085701环境工程295求调剂，一志愿A区211 +7 等春来， 2026-03-06 8/400 2026-03-06 22:04 by 星空星月
[考研] 一志愿211，0860总分286食品工程专业求调剂 +6 林林Winnie 2026-03-05 6/300 2026-03-06 20:06 by 我想上研究生.
[考研] 085600材料与化工（高分子）290分求调剂 +9 wengyujian 2026-03-04 9/450 2026-03-06 15:59 by 聪明的大松鼠
[考研] 求调剂 +5 danyyyy 2026-03-04 5/250 2026-03-06 08:16 by Leeding1356
[考研] 274求调剂 +9 一个学习者 2026-03-04 9/450 2026-03-05 20:56 by 黑衣馒头人
[考研] 求调剂 +3 泡了个椒 2026-03-04 4/200 2026-03-05 14:37 by 泡了个椒
[考研] 316求调剂 +3 林小星发大财 2026-03-04 3/150 2026-03-05 07:49 by bxbo
[考研] 求调剂 +7 博斯特525 2026-03-04 7/350 2026-03-04 18:09 by houyaoxu
[考研] 322,求调剂 +3 菜菜爱玩 2026-03-04 3/150 2026-03-04 12:15 by xiongyaxuan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭