24小时热门版块排行榜    

查看: 1600  |  回复: 5
【悬赏金币】回答本帖问题,作者winnerwfy将赠送您 20 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

winnerwfy

新虫 (初入文坛)

[求助] 枯草芽孢杆菌整合型质粒电转化效率 已有3人参与

请问有做过枯草芽孢杆菌整合型质粒pAX01和pDG1730的电转化的吗?同样的过程,电转化加入300ng质粒,游离型质粒能长上百个,整合型的却一个不长,是不是需要更多的质粒,这样的结果表明转化效率低还是整合效率极低?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyyycc2021

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主成功了吗,我们也是这个整合型质粒,自然转化效率比较高,可以考虑换一个方法
5楼2022-07-28 18:05:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

mengyouren

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

游离质粒转化没问题,整合质粒可考虑是否做了线性化后再转化,转化效率和整合效率可能都会提高
2楼2021-07-14 11:41:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ggdy3478

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

兄弟你好,我们也在做这个整合实验,发现能长单克隆,但发酵没有产物,请问你的枯草芽孢杆菌能否借一份给我们试试,我们的和你们的一起转化,转化子再给你们寄过去。非常谢谢。

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
青椒一个
3楼2021-07-15 05:54:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dskfhe123

新虫 (初入文坛)

最近也在做枯草芽孢杆菌的电转实验,但做了很久只成功过一两次,目前遇到以下问题:
1、电击时间常数达不到4ms,使用的是biorad的micropulser,应该用哪个程序会比较好?我目前使用Agr的预设程序,2.2kv,0.1cm电击杯
2、电转后挑的菌摇不起来,很清澈,或者是需要摇很久才浑浊,是电转的质粒影响菌的生长还是电转复苏的问题?我用的是RM培养基(加了海藻糖),100rpm,37度复苏

请大家帮帮忙~~
在课题组只有我一人做枯草芽孢杆菌,能请教的人实在不多

发自小木虫IOS客户端
4楼2021-10-10 13:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 5/250 2026-08-13 16:10 by majunge000
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见