24小时热门版块排行榜    

查看: 1368  |  回复: 5
【悬赏金币】回答本帖问题,作者winnerwfy将赠送您 20 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

winnerwfy

新虫 (初入文坛)

[求助] 枯草芽孢杆菌整合型质粒电转化效率 已有3人参与

请问有做过枯草芽孢杆菌整合型质粒pAX01和pDG1730的电转化的吗?同样的过程,电转化加入300ng质粒,游离型质粒能长上百个,整合型的却一个不长,是不是需要更多的质粒,这样的结果表明转化效率低还是整合效率极低?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyyycc2021

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主成功了吗,我们也是这个整合型质粒,自然转化效率比较高,可以考虑换一个方法
5楼2022-07-28 18:05:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

mengyouren

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

游离质粒转化没问题,整合质粒可考虑是否做了线性化后再转化,转化效率和整合效率可能都会提高
2楼2021-07-14 11:41:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ggdy3478

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

兄弟你好,我们也在做这个整合实验,发现能长单克隆,但发酵没有产物,请问你的枯草芽孢杆菌能否借一份给我们试试,我们的和你们的一起转化,转化子再给你们寄过去。非常谢谢。

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
青椒一个
3楼2021-07-15 05:54:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dskfhe123

新虫 (初入文坛)

最近也在做枯草芽孢杆菌的电转实验,但做了很久只成功过一两次,目前遇到以下问题:
1、电击时间常数达不到4ms,使用的是biorad的micropulser,应该用哪个程序会比较好?我目前使用Agr的预设程序,2.2kv,0.1cm电击杯
2、电转后挑的菌摇不起来,很清澈,或者是需要摇很久才浑浊,是电转的质粒影响菌的生长还是电转复苏的问题?我用的是RM培养基(加了海藻糖),100rpm,37度复苏

请大家帮帮忙~~
在课题组只有我一人做枯草芽孢杆菌,能请教的人实在不多

发自小木虫IOS客户端
4楼2021-10-10 13:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 2026考研求调剂-材料类-本科211一志愿985-初试301分 +5 虫友233 2026-03-07 5/250 2026-03-08 16:40 by 星空星月
[考研] 22408 275分求调剂 +3 宇智波比 2026-03-03 4/200 2026-03-08 12:47 by AaAa7420
[考研] 301求调剂 +5 一二LV 2026-03-07 5/250 2026-03-07 22:20 by 18137688336
[考研] 08工科 +4 li李乐成 2026-03-06 4/200 2026-03-07 21:46 by 韩应许
[考研] 材料325求调剂 30+6 mariusuki 2026-03-02 12/600 2026-03-07 20:12 by xindong
[考研] 0307化学求调剂 +6 0ok0k 2026-03-07 6/300 2026-03-07 20:10 by pies112
[考研] 第一志愿上海大学,专业化学工程与技术,总分288,求调剂 +3 1829197082 2026-03-07 3/150 2026-03-07 19:14 by houyaoxu
[考研] 267化工调剂求助 +7 聪少OZ 2026-03-04 7/350 2026-03-07 17:33 by 无际的草原
[考研] 304求调剂 +4 52hz~~ 2026-03-05 5/250 2026-03-07 15:47 by lature00
[考研] 求调剂 +4 呼呼?~+123456 2026-03-05 5/250 2026-03-06 23:15 by L135790
[考研] 085602高分子方向求调剂 +7 tlgudy 2026-03-04 7/350 2026-03-06 14:17 by guosr9609
[考研] 268求调剂 +4 刘合华 2026-03-05 4/200 2026-03-06 11:18 by lature00
[考研] 080500材料科学与工程 +13 202114020319 2026-03-03 13/650 2026-03-06 00:29 by wutongshun
[考研] 考研282分求调剂,接受跨专业 +4 刘淄博 2026-03-04 7/350 2026-03-05 22:56 by 刘淄博
[考研] 274求调剂 +9 一个学习者 2026-03-04 9/450 2026-03-05 20:56 by 黑衣馒头人
[考研] 材料与化工,291,求调剂 +7 咕噜咕噜123123 2026-03-05 8/400 2026-03-05 20:08 by houyaoxu
[考研] 一志愿郑州大学,学硕,物理化学, 333求调剂 +5 李魔女斗篷 2026-03-04 5/250 2026-03-04 18:33 by houyaoxu
[考研] 0857求调剂 +4 CDDD1013 2026-03-04 4/200 2026-03-04 16:08 by zhukairuo
[论文投稿] EST拒稿重投 5+3 15102603076 2026-03-02 3/150 2026-03-04 00:51 by bobvan
[考研] 275求调剂 +3 L-xin? 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:22 by 热情沙漠
信息提示
请填处理意见