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[交流]
真菌的ITS区长度可以是300bp吗?
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我用真菌的通用引物ITS1和ITS4扩增它的ITS区,得到了非特异的条带,其中有长度为300bp左右的条带,我想问一下高手们,真菌的ITS区长度可以是300bp吗? 因为我是用的降解纤维素的复合菌系直接扩增的,所以如果想通过测序直接证明,必须建库,比较费时费力。 所以我想问一下对这方面比较熟悉的高手,可以给我提供文献来证明吗? 非常感谢 |
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9楼2010-02-18 16:50:47
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xiaoxiaolu1777(金币+1):谢谢参与
xiaoxiaolu1777(金币+1):谢谢参与
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http://www.baidu.com/s?wd=5.8S%B3%A4%B6%C8 5.8S长度为160多bp,通用引物分别依靠18和28S基因序列来设计,所以长度应该由两个可变区来决定。我做过的超过20个真菌结果都是约600bp,鉴定结果多属于曲霉属和枝孢属,其它几属个别分布,但长度与楼主所述相差甚远。可能是楼主的真菌两个可变区确实很短,或者是非特异性PCR造成。试着改变一下退火温度,最好是有梯度PCR,效率高一些。 |

8楼2010-02-18 16:49:31













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