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GinTonic

金虫 (小有名气)

[交流] 关于8M尿素的问题

最近在纯化带有his标签的融合蛋白,用的是变性方法,现在的问题是纯化出来的蛋白经透析除掉8M尿素后,蛋白不溶于普通的PBS buffer,这样该如何测蛋白浓度?如何去打兔子制备抗体啊
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
估计你是在变性之后没有复性吧,复性之后在溶解。
7楼2009-08-30 09:05:12
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果不复性的话只有用电泳来估计一下了
2楼2009-08-11 14:37:56
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qdwmq

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
蛋白不溶于普通的PBS buffer是沉淀的意思么?
那样的话使蛋白浓度太高了。
3楼2009-08-30 00:22:02
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t85434577563

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用尿素重新溶解后加入终浓度为千分之1的SDS,应该不会沉淀,然后透析到PBS,最后由BCA的方法测定蛋白浓度,蛋白溶液中的SDS不会影响免疫效果
5楼2009-08-30 08:08:08
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