24小时热门版块排行榜    

查看: 1562  |  回复: 9
当前主题已经存档。

GinTonic

金虫 (小有名气)

[交流] 关于8M尿素的问题

最近在纯化带有his标签的融合蛋白,用的是变性方法,现在的问题是纯化出来的蛋白经透析除掉8M尿素后,蛋白不溶于普通的PBS buffer,这样该如何测蛋白浓度?如何去打兔子制备抗体啊
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果不复性的话只有用电泳来估计一下了
2楼2009-08-11 14:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qdwmq

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
蛋白不溶于普通的PBS buffer是沉淀的意思么?
那样的话使蛋白浓度太高了。
3楼2009-08-30 00:22:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)

蛋白没有复性
4楼2009-08-30 07:53:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

t85434577563

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用尿素重新溶解后加入终浓度为千分之1的SDS,应该不会沉淀,然后透析到PBS,最后由BCA的方法测定蛋白浓度,蛋白溶液中的SDS不会影响免疫效果
5楼2009-08-30 08:08:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
免疫的话直接用变性的免疫也可以啊,没必要透析除尿素的。
生物资源交流QQ群:1044518333
6楼2009-08-30 08:27:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cauzhangtao

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
估计你是在变性之后没有复性吧,复性之后在溶解。
7楼2009-08-30 09:05:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiani_tan

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
含有尿素的话会不会影响免疫的效果,兔子会不会死啊?
8楼2009-08-30 09:19:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
由8M尿素 直接稀释到 实测pH 8.5左右的 含有 0.5 M尿素的 PBS中, 蛋白一般不会洗出来。

这个稀释液或透析液就可以用来做实验啦。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
9楼2009-08-30 10:05:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GinTonic

金虫 (小有名气)

0.5M的尿素不会对兔子有影响吧
10楼2009-08-30 15:48:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 GinTonic 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 07化学280分求调剂 +6 722865 2026-03-23 6/300 2026-03-24 20:58 by allen-yin
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 材料与化工328分调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-23 4/200 2026-03-24 11:03 by 544594351
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 303求调剂 +4 元夕元 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:00 by macy2011
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
信息提示
请填处理意见