应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 目的基因扩不出来
51/1返回列表
查看: 1800  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 皓月星海 的 18 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

皓月星海

新虫 (小有名气)

[交流] 目的基因扩不出来

这个实验卡了很久了，目的条带P不出来。
我可以确定以下几个方面没问题。
第一，cdna没有问题，这个用其它引物验证过。
第二，我操作没有问题，我做其它引物都是成功的。
第三，所用试剂没问题，用的hifi酶。
除此之外，我已经设计了三对引物了，tm值大致都在55度到60度，上下游引物相差没有超过四度，每一对都从48度到65度进行了验证。均没有成功，甚至连杂带都看不到，就是啥都没有。
我人傻了，第一次遇到这种硬茬。我觉得跟引物有关系，因为初始序列就有些扯犊子，但是应该不至于啥也跑不出来呀，各位大哥帮忙看看，有哪些地方可能我没照顾到。谢谢大哥们

目的基因扩不出来


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2021-05-02 09:21:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)
★
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
可能你这个基因在这个cDNA里就是含量较低。数据库里查一下目的基因表达量较高的组织，用表达水平较高的组织来源的细胞重新提个RNA吧。
赞一下 回复此楼
5楼2021-05-02 12:25:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

皓月星海

新虫 (小有名气)
目的片段长度大概为1600左右

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2021-05-02 09:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好啊啊啊

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
皓月星海(fuyuandj86代发): 金币+4 2021-10-05 12:56:45
模版有损伤 重新来吧 连杂带都看不到肯定不正常

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2021-05-02 09:47:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengxueren

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
皓月星海(fuyuandj86代发): 金币+4 2021-10-05 12:56:52
做RACE吧

发自小木虫Android客户端
回复此楼
10楼2021-05-02 23:57:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
bjdxyxy9楼
2021-05-02 22:05   回复  
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
查看全部 21 个回答
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴，则可能无法领取此贴金币
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭