24小时热门版块排行榜    

查看: 1849  |  回复: 20
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 皓月星海 的 18 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

皓月星海

新虫 (小有名气)


[交流] 目的基因扩不出来

这个实验卡了很久了,目的条带P不出来。
我可以确定以下几个方面没问题。
第一,cdna没有问题,这个用其它引物验证过。
第二,我操作没有问题,我做其它引物都是成功的。
第三,所用试剂没问题,用的hifi酶。
除此之外,我已经设计了三对引物了,tm值大致都在55度到60度,上下游引物相差没有超过四度,每一对都从48度到65度进行了验证。均没有成功,甚至连杂带都看不到,就是啥都没有。
我人傻了,第一次遇到这种硬茬。我觉得跟引物有关系,因为初始序列就有些扯犊子,但是应该不至于啥也跑不出来呀,各位大哥帮忙看看,有哪些地方可能我没照顾到。谢谢大哥们

目的基因扩不出来


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fengxueren

新虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
皓月星海(fuyuandj86代发): 金币+4 2021-10-05 12:56:52
10楼2021-05-02 23:57:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

皓月星海

新虫 (小有名气)


目的片段长度大概为1600左右

发自小木虫Android客户端
2楼2021-05-02 09:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好啊啊啊

新虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
皓月星海(fuyuandj86代发): 金币+4 2021-10-05 12:56:45
模版有损伤 重新来吧 连杂带都看不到肯定不正常

发自小木虫IOS客户端
3楼2021-05-02 09:47:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)



皓月星海(金币+1): 谢谢参与
可能你这个基因在这个cDNA里就是含量较低。数据库里查一下目的基因表达量较高的组织,用表达水平较高的组织来源的细胞重新提个RNA吧。
5楼2021-05-02 12:25:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
bjdxyxy9楼
2021-05-02 22:05   回复  
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856化工原理 +4 z2839474511 2026-03-10 4/200 2026-03-11 16:49 by 2020015
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-10 9/450 2026-03-11 16:37 by @飒飒飒飒
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-11 3/150 2026-03-11 14:41 by 学员8dgXkO
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[考研] 307求调剂 +6 超级伊昂大王 2026-03-10 6/300 2026-03-10 22:46 by 星空星月
[考研] 332材料求调剂 +6 zjy101327 2026-03-05 8/400 2026-03-10 17:55 by zjy101327
[考研] 0860求调剂(272分) +3 lllllcsjsj 2026-03-05 4/200 2026-03-10 15:29 by circleffyy
[考研] 材料与化工,291,求调剂 +12 咕噜咕噜123123 2026-03-05 13/650 2026-03-10 13:50 by allen-yin
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
[基金申请] 面上项目还需要AI说明吗? +3 liyundong 2026-03-08 3/150 2026-03-09 22:30 by kingkocxr
[考研] 295复试调剂 +4 简木ChuFront 2026-03-09 4/200 2026-03-09 21:49 by wangjihu
[硕博家园] 2026级硕士研究生招生/调剂 +3 知足常乐的乐 2026-03-06 5/250 2026-03-09 20:56 by 木瓜膏
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
[考研] 理学287分求调剂 +4 看看我. 2026-03-05 4/200 2026-03-08 22:11 by qingfeng258
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-08 3/150 2026-03-08 19:34 by ms629
[考研] 303求调剂 +8 forgman95 2026-03-05 10/500 2026-03-08 12:41 by 蓝莓都给你
[考研] 材料调剂 +7 ounce. 2026-03-05 15/750 2026-03-08 09:39 by wangjihu
[考研] 085701环境工程317分求调剂 +9 6汆尼9 2026-03-07 9/450 2026-03-08 06:41 by 刘兵
[考研] 282求调剂 +7 夕~日 2026-03-05 8/400 2026-03-05 21:31 by zzpnuli111
[考研] 求材料调剂 +4 berdmond 2026-03-05 4/200 2026-03-05 19:45 by 黑衣馒头人
信息提示
请填处理意见