24小时热门版块排行榜    

查看: 1863  |  回复: 20
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 皓月星海 的 18 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

皓月星海

新虫 (小有名气)


[交流] 目的基因扩不出来

这个实验卡了很久了,目的条带P不出来。
我可以确定以下几个方面没问题。
第一,cdna没有问题,这个用其它引物验证过。
第二,我操作没有问题,我做其它引物都是成功的。
第三,所用试剂没问题,用的hifi酶。
除此之外,我已经设计了三对引物了,tm值大致都在55度到60度,上下游引物相差没有超过四度,每一对都从48度到65度进行了验证。均没有成功,甚至连杂带都看不到,就是啥都没有。
我人傻了,第一次遇到这种硬茬。我觉得跟引物有关系,因为初始序列就有些扯犊子,但是应该不至于啥也跑不出来呀,各位大哥帮忙看看,有哪些地方可能我没照顾到。谢谢大哥们

目的基因扩不出来


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

皓月星海

新虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 好啊啊啊 at 2021-05-02 09:47:37
模版有损伤 重新来吧 连杂带都看不到肯定不正常

模板应该没有问题吧,另外一个长度差不多的目的基因都可以P出来呀

发自小木虫Android客户端
14楼2021-05-06 08:49:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

皓月星海

新虫 (小有名气)


目的片段长度大概为1600左右

发自小木虫Android客户端
2楼2021-05-02 09:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好啊啊啊

新虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
皓月星海(fuyuandj86代发): 金币+4 2021-10-05 12:56:45
模版有损伤 重新来吧 连杂带都看不到肯定不正常

发自小木虫IOS客户端
3楼2021-05-02 09:47:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)



皓月星海(金币+1): 谢谢参与
可能你这个基因在这个cDNA里就是含量较低。数据库里查一下目的基因表达量较高的组织,用表达水平较高的组织来源的细胞重新提个RNA吧。
5楼2021-05-02 12:25:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
bjdxyxy9楼
2021-05-02 22:05   回复  
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 +3 快乐的香蕉 2026-03-11 3/150 2026-03-13 12:37 by houyaoxu
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +4 Becho359 2026-03-11 4/200 2026-03-13 12:18 by 历史课代表百度
[考研] 304求调剂(085602一志愿985) +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 【0856】化学工程(085602)313 分,本科学科评估A类院校化学工程与工艺,诚求调剂 +6 小刘快快上岸 2026-03-11 6/300 2026-03-13 11:11 by houyaoxu
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考研] 274求调剂0856材料化工 +12 z2839474511 2026-03-11 13/650 2026-03-13 10:39 by peike
[考研] 08食品或轻工求调剂,本科发表3篇sci一区top论文,一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵, 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +6 温乔乔乔乔 2026-03-12 9/450 2026-03-13 09:59 by houyaoxu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 一志愿天津大学材料与化工275求调剂 10+5 穿只靴子 2026-03-07 22/1100 2026-03-11 21:11 by kiokin
[考研] 0857 资源与环境 285分 +6 未名考生 2026-03-09 6/300 2026-03-11 21:08 by 30660438
[考研] 301求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-11 5/250 2026-03-11 20:43 by ms629
[考研] 接受26届调剂生 +22 猪猪猪毛 2026-03-06 23/1150 2026-03-11 14:55 by Lly031128
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[考研] 0817学硕华东区求调剂 +3 30660438 2026-03-08 3/150 2026-03-10 16:55 by Pegasus0429
[考研] 0817一志愿苏州大学280复试调剂 +9 kk扛 2026-03-07 9/450 2026-03-10 14:20 by peike
[硕博家园] 木虫好像不热闹了,是不是? +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
[考研] 求调剂,一志愿江南大学,食品科学与工程,总分,320 +3 yyyyyukino 2026-03-07 3/150 2026-03-08 23:07 by 清风月
[考研] 一志愿武汉理工085601,初试301分,请问能调剂到湖北吗 +3 肖yang 2026-03-06 3/150 2026-03-07 19:08 by ms629
[考研] 276求调剂 本科天津工业大学 一志愿北京化工大学0855 +4 路lyh123 2026-03-06 6/300 2026-03-07 11:37 by shdliugang
信息提示
请填处理意见