24小时热门版块排行榜    

查看: 1857  |  回复: 20
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 皓月星海 的 18 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

皓月星海

新虫 (小有名气)


[交流] 目的基因扩不出来

这个实验卡了很久了,目的条带P不出来。
我可以确定以下几个方面没问题。
第一,cdna没有问题,这个用其它引物验证过。
第二,我操作没有问题,我做其它引物都是成功的。
第三,所用试剂没问题,用的hifi酶。
除此之外,我已经设计了三对引物了,tm值大致都在55度到60度,上下游引物相差没有超过四度,每一对都从48度到65度进行了验证。均没有成功,甚至连杂带都看不到,就是啥都没有。
我人傻了,第一次遇到这种硬茬。我觉得跟引物有关系,因为初始序列就有些扯犊子,但是应该不至于啥也跑不出来呀,各位大哥帮忙看看,有哪些地方可能我没照顾到。谢谢大哥们

目的基因扩不出来


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

皓月星海

新虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 好啊啊啊 at 2021-05-02 09:47:37
模版有损伤 重新来吧 连杂带都看不到肯定不正常

模板应该不会损伤吧,正常提取的啊

发自小木虫Android客户端
11楼2021-05-03 13:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

皓月星海

新虫 (小有名气)


目的片段长度大概为1600左右

发自小木虫Android客户端
2楼2021-05-02 09:22:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

好啊啊啊

新虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
皓月星海(fuyuandj86代发): 金币+4 2021-10-05 12:56:45
模版有损伤 重新来吧 连杂带都看不到肯定不正常

发自小木虫IOS客户端
3楼2021-05-02 09:47:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)



皓月星海(金币+1): 谢谢参与
可能你这个基因在这个cDNA里就是含量较低。数据库里查一下目的基因表达量较高的组织,用表达水平较高的组织来源的细胞重新提个RNA吧。
5楼2021-05-02 12:25:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
bjdxyxy9楼
2021-05-02 22:05   回复  
皓月星海(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂,材料、化工皆可 +6 苏打水7777 2026-03-11 6/300 2026-03-12 14:26 by 455484
[考研] 求调剂 +5 18880831720 2026-03-11 5/250 2026-03-12 08:42 by 30660438
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-10 9/450 2026-03-11 16:37 by @飒飒飒飒
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
[考研] 一志愿天大化工(085600)调剂总分338 +5 蔡大美女 2026-03-09 5/250 2026-03-10 14:44 by ruiyingmiao
[考研] 278求调剂 +8 Gale1314 2026-03-06 8/400 2026-03-10 14:18 by Linda Hu
[考博] 求材料读博院校 +9 yanglei131 2026-03-08 9/450 2026-03-10 11:54 by 天道酬勤2026686
[考研] 334求调剂 +5 Trying] 2026-03-07 5/250 2026-03-09 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 0703化学求调剂 +4 很老实人 2026-03-09 4/200 2026-03-09 13:38 by macy2011
[考研] 296求调剂 +4 Xinyu Wu311 2026-03-09 4/200 2026-03-09 11:51 by 勇敢太监王公公
[考研] 293一志愿华东理工 0817化学工程与技术 调剂 +5 fjj0912 2026-03-07 5/250 2026-03-09 09:13 by 30660438
[考研] 求调剂,一志愿江南大学,食品科学与工程,总分,320 +3 yyyyyukino 2026-03-07 3/150 2026-03-08 23:07 by 清风月
[考研] 269求调剂 +3 朔朔话 2026-03-08 4/200 2026-03-08 20:39 by 热情沙漠
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-08 3/150 2026-03-08 19:34 by ms629
[考研] 求调剂,一志愿华中科大0702,数一英一,293 +4 小罗露一二 2026-03-07 4/200 2026-03-08 16:36 by 星空星月
[考研] 085701环境工程专业,初试305,均过国家A区线 +7 卡卡来了@ 2026-03-07 8/400 2026-03-08 06:40 by 刘兵
[考研] 材料科学(0805)338 求调剂 +7 xiaokang3286 2026-03-07 7/350 2026-03-08 03:42 by lfhuang
[考研] 085600材料与化工 292分 求调剂 +6 程晴之 2026-03-06 6/300 2026-03-07 09:22 by 斩魂滴兔子!
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-06 4/200 2026-03-06 15:51 by 聪明的大松鼠
信息提示
请填处理意见