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求助：POD酶的测定
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我最近在测植物中POD酶的含量，采用的方法如下：称取5.0g植物叶片，切碎，放入研钵中，加适量的磷酸缓冲液研磨成浆。将匀浆液全部转入离心管中，于3000g离心10min，上淸液转入25ml容量瓶中。沉淀用5ml PBS缓冲液再提取两次，上淸液并入容量瓶中，定容至刻度低温下保存备用。酶活性测定的反应体系包括：2.9mlPBS缓冲液、1.0ml2%H2O2、1.0ml0.05mol/L愈创木酚和0.1ml酶液，用酒精灯加热煮沸的酶液为对照。470nm波长下比色，每隔1min记录一次吸光度，共记录5次。 我不知道这个方法是否有缺陷，每次在煮沸对照酶液的时候，原本透明的对照酶液一经加热，就会变成淡淡的乳白色，  然后以它为对照，在紫外分光光度计上测定别的样品液的时候，样品液的吸光值就是负值， 而且样品液在试管中没有问题，可是倒入比色皿、放入紫外分光光度计中后，就会产生很多小气泡，也不知道该怎么处理，请问大家有什么好的方法吗？就是1.解决POD酶含量的测定问题；2.解决比色皿中不断产生小气泡的问题。多谢多谢！[ Last edited by skywalkerelf on 2009-8-10 at 11:12 ] |
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