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his蛋白挂柱效率低 已有1人参与
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C端6xhis蛋白（108kda）纯化时，使用GE的6FF树脂，载量为每毫升树脂载40mg标签蛋白，确定不过载。 且质粒测序结果正确，ORF框及his标签均正确。 尝试将his标签增加至10his，或在N端再添加 6xhis后，仍在流出液中有大量目的蛋白存在。 改变上柱的粗酶液的浓度及上样标签蛋白量也没能改善 求助该如何解决呢   @hc-material @gyesang 发自小木虫Android客户端 |
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Nansenary
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2楼2021-04-19 00:43:42
Nansenary
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1.上样我们一般咪唑浓度20mM。2.载量我们一般计算动态载量，最大载量我们一般是不考虑的，动态载量一般是最大载量的百分之30。3.根据柱直径，柱床高度，降低上样速度。 发自小木虫IOS客户端 |
8楼2021-04-22 19:53:55
snoopyzxx
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9楼2021-04-22 21:16:29
snoopyzxx
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10楼2021-04-22 21:18:48