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小树懒很好

新虫 (小有名气)

[求助] his蛋白挂柱效率低 已有1人参与

C端6xhis蛋白(108kda)纯化时,使用GE的6FF树脂,载量为每毫升树脂载40mg标签蛋白,确定不过载。
且质粒测序结果正确,ORF框及his标签均正确。
尝试将his标签增加至10his,或在N端再添加
6xhis后,仍在流出液中有大量目的蛋白存在。

改变上柱的粗酶液的浓度及上样标签蛋白量也没能改善
求助该如何解决呢

his蛋白挂柱效率低


his蛋白挂柱效率低-1


@hc-material @gyesang 发自小木虫Android客户端
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ericdoner

新虫 (初入文坛)

1.上样我们一般咪唑浓度20mM。2.载量我们一般计算动态载量,最大载量我们一般是不考虑的,动态载量一般是最大载量的百分之30。3.根据柱直径,柱床高度,降低上样速度。

发自小木虫IOS客户端
8楼2021-04-22 19:53:55
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Nansenary

新虫 (初入文坛)

2楼2021-04-19 00:43:42
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Nansenary

新虫 (初入文坛)

3楼2021-04-19 00:43:59
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

缓冲液pH多少?缓冲液里咪唑含量有多少?
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-04-19 12:31:53
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