应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » his蛋白挂柱效率低
212/3返回列表上一页123下一页
查看: 2587  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者小树懒很好将赠送您 10 个金币

小树懒很好

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-04-19 22:40:11
GE的6FF树脂什么的都无关紧要。你有用Ni树脂或Co树脂嘛？

嗯嗯，是用的镍亲和树脂

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
11楼2021-04-23 02:16:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小树懒很好

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ericdoner at 2021-04-22 19:53:55
1.上样我们一般咪唑浓度20mM。2.载量我们一般计算动态载量，最大载量我们一般是不考虑的，动态载量一般是最大载量的百分之30。3.根据柱直径，柱床高度，降低上样速度。
...

好的，谢谢，大概流速多少呢，1ml/min吗

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
12楼2021-04-23 02:18:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小树懒很好

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-04-22 21:16:29
氯化钠浓度提高到1-1.5M

请问这个提高盐离子浓度有什么原理呢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
13楼2021-04-23 02:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小树懒很好

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-04-22 21:18:48
另外你需要搞清楚你标记的那条带到底是不是你的目的带。与目的带大小一致不一定是目的带，也可能是菌体蛋白。

嗯嗯，做了空菌的对照样品，就是图中的PET，然后那个位置差不多没有带，应该是目的蛋白，纯化后也在那个位置，并且酶促反应有活性

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
14楼2021-04-23 02:23:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 小树懒很好 at 2021-04-23 02:21:40
请问这个提高盐离子浓度有什么原理呢
...

可以使某些蛋白的标签暴露出来，同时减少离子性的非特异吸附。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

小树懒很好
VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
15楼2021-04-23 07:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ericdoner

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 小树懒很好 at 2021-04-23 02:18:40
好的，谢谢，大概流速多少呢，1ml/min吗
...

你的柱高，柱直径多少呢？确定是不是你的目的蛋白不能用WB么？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
16楼2021-04-23 09:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小树懒很好

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-04-23 07:08:54
可以使某些蛋白的标签暴露出来，同时减少离子性的非特异吸附。
...

好的，非常感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼
17楼2021-04-23 10:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小树懒很好

新虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by ericdoner at 2021-04-23 09:13:31
你的柱高，柱直径多少呢？确定是不是你的目的蛋白不能用WB么？
...

柱子用的伯乐的20ml预装柱，直径大概两厘米，WB的话我们实验室没做过

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
18楼2021-04-23 10:53:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海燕追梦

新虫 (正式写手)
增加蛋白和填料的结合时间，洗脱时候减少咪唑浓度，最好用his抗体WB验证一些质粒表达的正确性

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
19楼2021-04-23 21:51:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小树懒很好

新虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 海燕追梦 at 2021-04-23 21:51:47
增加蛋白和填料的结合时间，洗脱时候减少咪唑浓度，最好用his抗体WB验证一些质粒表达的正确性

嗯嗯，我这次孵育了3h，感觉变化不大，我看看能不能找地方做一下WB

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
20楼2021-05-03 06:14:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小树懒很好 的主题更新
212/3返回列表上一页123下一页
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭