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greatsaint银虫 (小有名气)
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[交流]
TA克隆及测序问题
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我现在将PCR产物用克隆试剂盒做了TA克隆，将筛选的阳性克隆做菌液PCR，鉴定阳性克隆时用的引物是第一次PCR时的引物，没用试剂盒中克隆载体上的M13F、M13R通用引物，结果没有扩增出来。我以前这么做过并得到了目的片段，不知道这次怎么没有成功。 用载体上的通用引物鉴定和用原引物通过鉴定有差别吗？ 我想再问下，这种TA克隆不算是定向克隆吧？那测出来的岂不是正反义链两条单链的序列？如何取舍？ |
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