24小时热门版块排行榜    

查看: 1090  |  回复: 16
当前主题已经存档。

小白3521

金虫 (小有名气)

[交流] 提RNA求助

刚开始作实验,先提RNA,材料是昆虫触角,开始用试剂盒提,什么都没有
后来怕触角耗费太多就先用足来试一下,但是只能提出一条带,用trizol也只能提出一条带。
研磨是用研钵磨的,用处理过的刀片刮下来转置离心管里,离心管和枪头都用DEPC处理过,过程中也小心,但是就是提不出来,请大家帮帮忙啊
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验技术自我提高

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

轻5飞扬

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-8 10:41
呵呵,你的描述太少了,trouble shooting不好做啊,但你说的一条带我估计是降解的条带,如果题没有问题的话,建议在跑交方面找找问题
2楼2009-08-07 16:11:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小白3521

金虫 (小有名气)

跑的电压150,10min,染色10min,配胶的水是用也是用的DEPC水,不过我电泳槽没有处理,因为师兄说他都不怎么处理的也能提出来,难道是这个原因
3楼2009-08-07 16:24:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liugang66

铁杆木虫 (职业作家)

小鸟伯德


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 轻5飞扬 at 2009-8-7 16:11:
呵呵,你的描述太少了,trouble shooting不好做啊,但你说的一条带我估计是降解的条带,如果题没有问题的话,建议在跑交方面找找问题

学习了
有梦就有力量,有心就会成功!
4楼2009-08-07 16:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ncuhome

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-8 10:42
我觉得不是胶的问题,我制胶的时候没有用DEPC水处理的也照样跑出来了,RNA虽说会降解,但速度也没那么快,简单的DNA电泳,跑的时间短一点,也能清楚得看到目的片段的。
越努力,越幸运。
5楼2009-08-07 16:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小白3521

金虫 (小有名气)

我用的材料是5月份取的,放在-80冻了3个月,会不会已经降解了?我提了几次,都只有1条带
6楼2009-08-07 16:58:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holyala

木虫 (著名写手)

砖家


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
帮顶一下,马上也要做RNA提取了。学习学习~
7楼2009-08-07 17:24:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhjwin

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我的材料在-80度冻了一年,都没有问题,3条带很清楚,应该不是!楼主再找找别的问题
8楼2009-08-08 10:41:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0):鼓励一下! 8-9 15:31
是不是加太多trizol去提了
核酸太稀沉淀不下来
9楼2009-08-08 13:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

十比

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-9 15:31
材料存在-80度肯定不会有问题,我觉得提RNA关键是磨样时要用液N使材料时刻保持低温,转移至离心管里要迅速,只有放进Trizol里就不怕了!
    电泳时换新的电泳液就行,不需做什么处理,电泳跑个15-20分都行。
10楼2009-08-08 14:56:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小白3521 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 08工学调剂 +11 用户573181 2026-03-20 16/800 2026-03-24 20:36 by :@sbs123
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
信息提示
请填处理意见