24小时热门版块排行榜    

查看: 1247  |  回复: 16
当前主题已经存档。

小白3521

金虫 (小有名气)

[交流] 提RNA求助

刚开始作实验,先提RNA,材料是昆虫触角,开始用试剂盒提,什么都没有
后来怕触角耗费太多就先用足来试一下,但是只能提出一条带,用trizol也只能提出一条带。
研磨是用研钵磨的,用处理过的刀片刮下来转置离心管里,离心管和枪头都用DEPC处理过,过程中也小心,但是就是提不出来,请大家帮帮忙啊
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验技术自我提高

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

轻5飞扬

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-8 10:41
呵呵,你的描述太少了,trouble shooting不好做啊,但你说的一条带我估计是降解的条带,如果题没有问题的话,建议在跑交方面找找问题
2楼2009-08-07 16:11:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小白3521

金虫 (小有名气)

跑的电压150,10min,染色10min,配胶的水是用也是用的DEPC水,不过我电泳槽没有处理,因为师兄说他都不怎么处理的也能提出来,难道是这个原因
3楼2009-08-07 16:24:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liugang66

铁杆木虫 (职业作家)

小鸟伯德


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 轻5飞扬 at 2009-8-7 16:11:
呵呵,你的描述太少了,trouble shooting不好做啊,但你说的一条带我估计是降解的条带,如果题没有问题的话,建议在跑交方面找找问题

学习了
有梦就有力量,有心就会成功!
4楼2009-08-07 16:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ncuhome

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-8 10:42
我觉得不是胶的问题,我制胶的时候没有用DEPC水处理的也照样跑出来了,RNA虽说会降解,但速度也没那么快,简单的DNA电泳,跑的时间短一点,也能清楚得看到目的片段的。
越努力,越幸运。
5楼2009-08-07 16:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小白3521

金虫 (小有名气)

我用的材料是5月份取的,放在-80冻了3个月,会不会已经降解了?我提了几次,都只有1条带
6楼2009-08-07 16:58:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holyala

木虫 (著名写手)

砖家


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
帮顶一下,马上也要做RNA提取了。学习学习~
7楼2009-08-07 17:24:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhjwin

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我的材料在-80度冻了一年,都没有问题,3条带很清楚,应该不是!楼主再找找别的问题
8楼2009-08-08 10:41:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0):鼓励一下! 8-9 15:31
是不是加太多trizol去提了
核酸太稀沉淀不下来
9楼2009-08-08 13:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

十比

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-9 15:31
材料存在-80度肯定不会有问题,我觉得提RNA关键是磨样时要用液N使材料时刻保持低温,转移至离心管里要迅速,只有放进Trizol里就不怕了!
    电泳时换新的电泳液就行,不需做什么处理,电泳跑个15-20分都行。
10楼2009-08-08 14:56:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小白3521 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 18:22 by 7huP8NPKZCp9
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 3/150 2026-08-15 14:53 by QXtWNz7PI7wZ
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 14:41 by QXtWNz7PI7wZ
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +7 majunge000 2026-08-11 9/450 2026-08-15 13:34 by kiz2011
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 07:09 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见