| 查看: 2720 | 回复: 12 | |||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者Ma丶lone将赠送您 30 个金币 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
求助，毕赤酵母系统表达阿魏酸酯酶，蛋白没有活性，可能哪些问题，该怎么解决现状？ 已有2人参与
|
|||
|
本人初入分子生物，用PPIZCA质粒重组了阿魏酸酯酶的基因序列，然后我把重组质粒导入毕赤酵母中。结果是，PCR和测序验证基因大小和序列没问题，western blot也做了能看到所在处清晰的条带，但是有一次出现了包涵体，这一次没有，我用这一次的粗酶液和提纯的蛋白测试酶活性，结果一点活性没有。请教大佬帮我分析一下可能的原因和解决办法。 @gyesang @hc-material 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？
已经有13人回复
-
2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B?
已经有4人回复
-
应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键
已经有29人回复
-
奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样
已经有9人回复
-
是这周出结果还是下周出结果？
已经有3人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有9人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有4人回复
-
帮忙看看fileCode
已经有13人回复
-
为什么网上很多人说本周 12号出结果
已经有7人回复
-
读博的好处
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
|
嗯嗯，我的是胞内表达，用的200w，10s超声，10s停止，一共20min的超声条件，加了ripa和pi，我这个是水解酶，不知道是我在提的过程中失活了。对了，我的粗酶液酶活检测，是我50毫升培养液取了100微升的上清做的活性检测，这个量是有些少了吗？一般需要富集粗酶液吗？ 发自小木虫Android客户端 |
6楼2021-03-30 14:18:56
forhighbio 
捐助贵宾 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 825.8
- 散金: 100
- 红花: 20
- 帖子: 1200
- 在线: 20.3小时
- 虫号: 15753792
- 注册: 2019-07-28
- 专业: 微生物学
2楼2021-03-28 11:07:24
3楼2021-03-28 12:48:27
snoopyzxx
木虫 (著名写手)
- BioEPI: 4
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 2891.1
- 散金: 1276
- 红花: 43
- 帖子: 2259
- 在线: 277.9小时
- 虫号: 548497
- 注册: 2008-04-19
- 性别: MM
- 专业: 全球变化生态学
4楼2021-03-28 22:42:20
