应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE结果出来一片空白
141/2返回列表12下一页
查看: 884  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

Evan3952

木虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE结果出来一片空白

刚跑电泳，考马斯亮蓝染色出来的结果一片空白，连marker都没有，各位给点意见，大致情况这样：
1.用的是4%和20%的胶，maker（26bp起）浓度25ug/ml，我加了20ul
2.用甘氨酸，100付电
3.溴酚蓝跑到后面出现2条带，一粗一细，是否是因为溴酚蓝加多了？
4.考马斯亮蓝配得比较久，有没影响？从我来之前就有人配的，只是没什么人用， 至少1-2年，室温保存的，我用的时候那滤纸过滤了一下
5.胶是即配即用的，
6.AP，SDS用的是普通的分析纯，很想知道这些试剂有哪些是必须买电泳专用的？
7.染色染了30-60min，整背景是蓝的，那水冲冲看着就出了溴酚蓝，其他都浅蓝浅蓝一片的，脱色后就白茫茫一片了，对着就欲哭无泪。。。
8.东西对热还是比较稳定的，11bp左右大
9.水这边用的都是二级渗透的

大家帮帮忙，看看怎么回事。。。。。。

[ Last edited by Evan3952 on 2009-8-7 at 03:37 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2009-08-07 03:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chengML

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这么久了的溴酚蓝还用啊？有时想省事，结果会是多事
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-08-07 03:46:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Evan3952

木虫 (小有名气)
是考马斯亮蓝啦，是不是不能用了 啊？
赞一下 回复此楼
3楼2009-08-07 04:41:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuezhen

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-7 12:47
有没有进行脱色呀？有时要脱色久一点，才能看到结果的。可以用7%的冰醋酸进行过夜轻微摇床震荡脱色。染色染个20-30min就可以了，脱色挺关键的，不然就是你的染液有问题了。一定要脱色的，直到脱色液较澄清吧！希望对你有用。呵呵！
赞一下(11人) 回复此楼
4楼2009-08-07 09:49:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
DNA应该是EB染色，考染是观察蛋白的。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2009-08-07 12:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-7 12:48
你做的是蛋白还是DNA啊？
如果是DNA建议用EB
如果是蛋白 我估计是你把样品跑出去了的可能性大 再者你的电泳缓冲液有问题
赞一下(11人) 回复此楼
海纳百川止于至善
6楼2009-08-07 12:42:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qfzhang

银虫 (小有名气)
AP估计过期了吧
回复此楼
7楼2009-08-07 13:49:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greatsun

木虫 (正式写手)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-7 15:17
如果Marker都没有的话，建议再跑一次看看！！

有时做实验就是很奇怪，条件一样，结果就是不一样！！
赞一下(6人) 回复此楼
8楼2009-08-07 15:16:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiani_tan

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也碰到这种情况了，跑的是蛋白质，考马斯亮蓝染色后过夜脱色，loading buffer颜色不太对，挺浅的，但是按照配方来的）
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-08-07 15:40:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Evan3952

木虫 (小有名气)
谢谢各位
我跑的是蛋白，只是maker用的是酶切出来的片段，主要是想看看有多少个蛋白，昨天做不出来后就把它泡在洗脱液里过夜，之前没做过银染，今天去了想着坏了都坏了，就拿去做银染，对着书做，结果就出带了，只是跑的不是很好
不过好歹出带了，应该考马斯亮蓝不行，这次亏真是吃大了
不过很想问一句，AP跟SDS分析纯没问题吧？
赞一下 回复此楼
10楼2009-08-07 23:29:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 suzieeee 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300分，材料，求调剂，英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 材料与化工考研调剂 +7 孅華 2026-03-22 7/350 2026-03-24 21:04 by greychen00
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 306求调剂 +9 chuanzhu川烛 2026-03-18 9/450 2026-03-23 13:17 by luoyongfeng
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿深大，0703化学，总分302，求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华南师大 070300（化学）304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕，总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭