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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助液相压力3500以上，峰型不对称，解决办法？
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tangbaicai

新虫 (小有名气)

[交流] 求助液相压力3500以上，峰型不对称，解决办法？

新手做高压液相色谱，做虎杖苷标准曲线，甲醇：水=45：55（流动相），流动相溶解样品，样品浓度是100ug/ml，进样10ul,
       用的是新柱子，用前纯甲醇冲洗过，压力3500以上，峰型上尖下宽，且不对称。请问怎么办？可能哪里出了问题？如果柱子堵了怎么办？（不想换新柱）十分谢谢了。

[ Last edited by tangbaicai on 2009-8-5 at 17:22 ]
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我们会不会相忘于江湖？
1楼 2009-08-05 17:11:07
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
tangbaicai(金币+1):谢谢参与
tangbaicai(金币+1,VIP+0): 8-5 17:22
可能柱子有些堵，听你的描述，峰有拖尾现象，可以在缓冲液 中加点三乙胺，就不拖了。
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除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。
2楼2009-08-05 17:16:32
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tangbaicai

新虫 (小有名气)
加多少三乙胺？浓度是多少？加在甲醇里还是纯水里，我用的是双泵。
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我们会不会相忘于江湖？
3楼2009-08-05 17:24:46
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algerho

金虫 (小有名气)
★
tangbaicai(金币+1):谢谢参与
1 是否你的柱子是新的，填料密，导致压力高，担心压力高就改用乙腈-水作为流动相
2 如果是柱子有点堵，就用低流速冲洗
3 峰形的问题，可以改变流动相的比例以及类型，调节柱温。
三乙胺加在水里，你加碱要注意pH，比例要查一下
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4楼2009-08-05 17:51:14
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tangbaicai

新虫 (小有名气)
昨天用乙腈和水（1：1）冲了半天，结果进样还是有肩峰，1ml/min流速。
我今天用纯甲醇冲了5个小时，1ml/min流速是不是太大了？
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我们会不会相忘于江湖？
5楼2009-08-05 18:02:35
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ygw8

铁虫 (小有名气)
★
tangbaicai(金币+1):谢谢参与
1ml/min不大正常流速，我觉得你说的峰上尖下宽没什么问题啊，正常峰都这样啊，最好能吧图贴出来，甲醇的比例在40%~60%时，压力较大，50%为最大。把图贴出来大家帮你分析
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6楼2009-08-06 15:18:23
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tangbaicai

新虫 (小有名气)
下面的附件就是我用新柱子所做的图，大家帮我分析一下，
流动相甲醇：水=45：55，这两个图是两个纯品混合在一起的，理论上出两个尖峰。
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我们会不会相忘于江湖？
7楼2009-08-06 16:42:50
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tangbaicai

新虫 (小有名气)
不好意思啊，我还不会上传图片，发了个附件，我马上学习
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我们会不会相忘于江湖？
8楼2009-08-06 17:09:46
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zsqycxy

至尊木虫 (著名写手)
★
tangbaicai(金币+1):谢谢参与
先用纯甲醇冲洗看压力多少，在进样
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9楼2009-08-06 18:00:55
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cihinustc

★
tangbaicai(金币+1):谢谢参与
高手很多嘛
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10楼2009-08-06 21:56:18
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