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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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tangbaicai

新虫 (小有名气)

[交流] 求助液相压力3500以上,峰型不对称,解决办法?

新手做高压液相色谱,做虎杖苷标准曲线,甲醇:水=45:55(流动相),流动相溶解样品,样品浓度是100ug/ml,进样10ul,
       用的是新柱子,用前纯甲醇冲洗过,压力3500以上,峰型上尖下宽,且不对称。请问怎么办?可能哪里出了问题?如果柱子堵了怎么办?(不想换新柱)十分谢谢了。

[ Last edited by tangbaicai on 2009-8-5 at 17:22 ]
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我们会不会相忘于江湖?
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
tangbaicai(金币+1):谢谢参与
tangbaicai(金币+1,VIP+0): 8-5 17:22
可能柱子有些堵,听你的描述,峰有拖尾现象,可以在缓冲液 中加点三乙胺,就不拖了。
除了你的亲人,没有人应该对你好,对你好的人,一定要珍惜。
2楼2009-08-05 17:16:32
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tangbaicai

新虫 (小有名气)

加多少三乙胺?浓度是多少?加在甲醇里还是纯水里,我用的是双泵。
我们会不会相忘于江湖?
3楼2009-08-05 17:24:46
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algerho

金虫 (小有名气)


tangbaicai(金币+1):谢谢参与
1 是否你的柱子是新的,填料密,导致压力高,担心压力高就改用乙腈-水作为流动相
2 如果是柱子有点堵,就用低流速冲洗
3 峰形的问题,可以改变流动相的比例以及类型,调节柱温。
三乙胺加在水里,你加碱要注意pH,比例要查一下
4楼2009-08-05 17:51:14
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tangbaicai

新虫 (小有名气)

昨天用乙腈和水(1:1)冲了半天,结果进样还是有肩峰,1ml/min流速。
我今天用纯甲醇冲了5个小时,1ml/min流速是不是太大了?
我们会不会相忘于江湖?
5楼2009-08-05 18:02:35
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ygw8

铁虫 (小有名气)


tangbaicai(金币+1):谢谢参与
1ml/min不大正常流速,我觉得你说的峰上尖下宽没什么问题啊,正常峰都这样啊,最好能吧图贴出来,甲醇的比例在40%~60%时,压力较大,50%为最大。把图贴出来大家帮你分析
6楼2009-08-06 15:18:23
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tangbaicai

新虫 (小有名气)

下面的附件就是我用新柱子所做的图,大家帮我分析一下,
流动相甲醇:水=45:55,这两个图是两个纯品混合在一起的,理论上出两个尖峰。
我们会不会相忘于江湖?
7楼2009-08-06 16:42:50
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tangbaicai

新虫 (小有名气)

不好意思啊,我还不会上传图片,发了个附件,我马上学习
我们会不会相忘于江湖?
8楼2009-08-06 17:09:46
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zsqycxy

至尊木虫 (著名写手)


tangbaicai(金币+1):谢谢参与
先用纯甲醇冲洗看压力多少,在进样
9楼2009-08-06 18:00:55
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cihinustc


tangbaicai(金币+1):谢谢参与
高手很多嘛
10楼2009-08-06 21:56:18
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