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tangbaicai

新虫 (小有名气)

[交流] 求助液相压力3500以上,峰型不对称,解决办法?

新手做高压液相色谱,做虎杖苷标准曲线,甲醇:水=45:55(流动相),流动相溶解样品,样品浓度是100ug/ml,进样10ul,
       用的是新柱子,用前纯甲醇冲洗过,压力3500以上,峰型上尖下宽,且不对称。请问怎么办?可能哪里出了问题?如果柱子堵了怎么办?(不想换新柱)十分谢谢了。

[ Last edited by tangbaicai on 2009-8-5 at 17:22 ]
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我们会不会相忘于江湖?
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tangbaicai

新虫 (小有名气)

昨天用乙腈和水(1:1)冲了半天,结果进样还是有肩峰,1ml/min流速。
我今天用纯甲醇冲了5个小时,1ml/min流速是不是太大了?
我们会不会相忘于江湖?
5楼2009-08-05 18:02:35
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
tangbaicai(金币+1):谢谢参与
tangbaicai(金币+1,VIP+0): 8-5 17:22
可能柱子有些堵,听你的描述,峰有拖尾现象,可以在缓冲液 中加点三乙胺,就不拖了。
除了你的亲人,没有人应该对你好,对你好的人,一定要珍惜。
2楼2009-08-05 17:16:32
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tangbaicai

新虫 (小有名气)

加多少三乙胺?浓度是多少?加在甲醇里还是纯水里,我用的是双泵。
我们会不会相忘于江湖?
3楼2009-08-05 17:24:46
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algerho

金虫 (小有名气)


tangbaicai(金币+1):谢谢参与
1 是否你的柱子是新的,填料密,导致压力高,担心压力高就改用乙腈-水作为流动相
2 如果是柱子有点堵,就用低流速冲洗
3 峰形的问题,可以改变流动相的比例以及类型,调节柱温。
三乙胺加在水里,你加碱要注意pH,比例要查一下
4楼2009-08-05 17:51:14
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