| 查看: 2355 | 回复: 4 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者hyy的笑将赠送您 30 个金币 | ||
[求助]
HPLC：乙腈/水梯度洗脱，乙腈比例增大后吸光度降低。 已有1人参与
|
||
 各位大神，求助HPLC问题。最近用HPLC测定苯酚，用的Kinetex 5u C18 100A的柱子，安捷伦的机子。 采用乙腈和水梯度洗脱：0-5 min 乙腈/水=20/80，也是这个比例调谐的；5-15 min 乙腈/水=95/5；15-20 min 乙腈/水=20/80。 刚开始的时候运行很正常，如图所示，当乙腈比例开始增大后UV的吸光度也有一点攀升。但是这周测试时发现当乙腈比例开始增加时，UV的吸光度开始变负，而苯酚正常出峰（如图：不是倒峰），算的浓度也正常。 想咨询一下各位大神这到底是出了什么问题？（压力正常，柱子也没问题，拆了柱子空着运行时，只要加大乙腈的比例吸光度就开始往负走）同一台机子，用低浓度硫酸做流动相测乙酸是完全正常。 我该怎么办。   @学术巨星 @wyy080214 @superyeast @klicking 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
职称评审没过，求安慰
已经有46人回复
-
回收溶剂求助
已经有7人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
-
垃圾破二本职称评审标准
已经有17人回复
-
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿
已经有22人回复
-
EST投稿状态问题
已经有7人回复
-
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦
已经有4人回复
-
求助文献
已经有3人回复
-
三无产品还有机会吗
已经有6人回复
hexued6933
版主 (著名写手)
日出东方，岂能不败
- 应助: 67 (初中生)
- 贵宾: 10.191
- 金币: 23201.5
- 散金: 13896
- 红花: 111
- 沙发: 3
- 帖子: 2681
- 在线: 722小时
- 虫号: 532050
- 注册: 2008-03-24
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
- 管辖: 标准与专利
2楼2021-03-06 13:21:14
送红花一朵 |
非常感谢你的回答。现在测纯水也是当乙腈比例增大后往负了跑，所以应该不是第一种情况。第二种可能，我的确是有时候测乙酸，有时候测苯酚（柱子不一样），但是这次出现这种情况后前前后后冲洗了两三天，也试着升温冲洗看是有什么难溶的物质没有，结果还是没啥变化  发自小木虫Android客户端 |
3楼2021-03-06 22:36:12
4楼2021-03-08 16:32:30
5楼2021-03-09 19:10:06